リボザイムライブラリーを用いたカドミウム誘導性細胞死に関与する因子の探索

使用核酶文库寻找镉诱导细胞死亡的相关因素

• 批准号: 05J03326
• 负责人: 西躰 元
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J03326/
• 关键词: カドミウム; MAPキナーゼ; ES細胞; HSP70; SEK1; MKK7; JNK; p38

カドミウム曝露に対する細胞内シグナル伝達機構については、未解明な部分が多く残されている。我々は、ERK、JNK、p38の3つの主要なサブファミリーからなるMAPKの関与について、ノックアウト、ノックダウン法を用いて検討した。まずJNKの活性化因子であるSEK1とMKK7を共に欠失したマウス胚性幹(ES)細胞を用いて、カドミウム曝露に対する細胞応答におけるMAPKの関与を検討した。SEK1・MKK7両欠損細胞にカドミウムを曝露し各MAPKの活性化を調べたところ、JNKの活性化が完全に抑えられただけでなく、p38およびERKの活性化も著しく抑制されていることを見出した。さらにカドミウム曝露における両欠損細胞でのストレス応答性遺伝子の発現を調べたところ、熱ショック蛋白HSP70の発現誘導が抑制されることを認めた。次にカドミウムを曝露したSEK1・MKK7両欠損細胞におけるHSP70発現誘導の抑制が、どのMAPKアイソフォームに依存しているのかをRNA干渉によるノックダウン法により検討した。各MAPKファミリーのアイソフォームに対するsmall interfering RNA(siRNA)を野生型ES細胞に導入後、カドミウムを曝露しHSP70蛋白レベルを測定した。その結果、ERK1、ERK2、JNK1、JNK2、P38αのsiRNAを導入した細胞において、カドミウム曝露によるHsP70発現誘導が著明に抑制されることを見出した。一方、p38β、38γのsiRNAを導入した細胞では、HSP70発現誘導の増強を認めた。以上の実験から、カドミウム曝露ES細胞では、SEK1およびMKK7はJNKのみならずp38とERKの活性化にも関与していること、さらにHSP70発現誘導は各MAPKアイソフォームおよびSEK1・MKK7による複合的な制御を受けることが示唆された。

It was exposed that there was a significant increase in the number of defects in the cells of the organization, and that some of the unexplained parts were damaged. We use the following methods: ERK, JNK, p38

项目成果

Differential regulation of HSP70 expression by the JNK kinases SEK1 and MKK7 in mouse embryonic stem cells treated with cadmium

• DOI: 10.1002/jcb.21743
• 发表时间: 2008-08
• 期刊: Journal of Cellular Biochemistry
• 影响因子: 4
• 作者: G. Nishitai;M. Matsuoka

Cadmium induces the expression of Grp78, an endoplasmic reticulum molecular chaperone, in LLC-PK1 renal epithelial cells.

镉在LLC-PK1肾上皮细胞中诱导GRP78（一种内质网分子伴侣）的表达。

• DOI: 10.1289/ehp.8920
• 发表时间: 2006-06
• 期刊: ENVIRONMENTAL HEALTH PERSPECTIVES
• 影响因子: 10.4
• 作者: Liu, Fang;Inageda, Kiyoshi;Nishitai, Gen;Matsuoka, Masato
• 通讯作者: Matsuoka, Masato

カドミウム曝露によるHSP70発現におけるMAPKの関与

镉暴露导致 MAPK 参与 HSP70 表达

• 发表时间: 2007
• 作者: 竹井成和;藤崎和香;西田眞也;Gen Nishitai;Junko Nakagawa;Katsura Suzuki;Masato Matsuoka;Fang Liu;西躰 元
• 通讯作者: 西躰 元