遺伝子工学に基づく肺保護タンパクを用いた新しい急性肺障害治療法の開発

使用基因工程肺保护蛋白开发新的急性肺损伤治疗方法

• 批准号: 17390424
• 负责人: 小谷 直樹
• 金额: $ 8.32万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17390424/
• 关键词: 急性肺障害; エラスターゼ; 遺伝子多型; アンギオテンシン変換酵素; RT-PCR; 肺胞マクロファージ; 炎症; サイトカイン; 抗菌能; 遺伝子発現; 手術; 麻酔; 肺胞気管洗浄

急性肺障害のメカニズムの究明ならびに治療法の開発は術中および術後管理において非常に重要なテーマである。我々はその中で、好中球エラスターゼが最も重要な指標となることをこれまでの報告で明らかにしてきた。しかしながら急性肺障害における好中球エラスターゼの反応性は個人毎に異なっており、予測が困難である。本年度はこの点に関して、個体における反応性の違いがどのような因子によって規定されるのか、あるいは相関するのかという点について研究を行った。我々はまず遺伝子多型に注目し、文献検索を行うことにより幾つかの候補遺伝子について検討する計画を立て、本年度はまず最初に呼吸循環系に重要な役割を果たすアンギオテンシン変換酵素(ACE)に着目し、この遺伝子多型解析の実験系をセットアップした。ACEの遺伝子多型にはDD型、DI型、II型があり、これらの多型を解析するためのブライマーの合成を行った。次に、ヒト血液(申請者)からDNAを抽出する実験系を確立し、RT-PCR法を用いて多型解析の予備実験を行った。ヒト血液DNA100ngをテンプレートとしてPCR反応を施行し、その産物を2%アガロースゲル電気泳動で解析した。その結果、ACE遺伝子多型解析のためのPCR反応の実験プロトコールを確立し、多型を分類するための予備実験を終了した。今後、他の関連分子の遺伝子多型の予備実験も考慮し、また臨床症例のサンプルの取扱、保存方法等を検討する予定である。

The development of treatment for acute lung disease is very important both during and after surgery. The most important indicator is that we should report to the public. Acute lung injury is a problem for individuals, and it is difficult to predict. This year, we will conduct research on the relationship between individual and non-compliance factors. We have established a plan to examine and evaluate the results of the initial study of important service cuts in the respiratory cycle system, including the development of an ACE enzyme (ACE) system for the analysis of genetic polymorphisms. ACE gene polymorphism analysis of DD type, DI type, II type The system for DNA extraction was established, and RT-PCR was used to prepare for polymorphism analysis. 100ng of blood DNA was detected by PCR and 2% of the products were detected by electroporation. The results, ACE gene polymorphism analysis, PCR amplification, and preparation were completed. In the future, the preparation of gene polymorphism of other related molecules shall be considered, and the collection and preservation methods of clinical cases shall be discussed.

项目成果

Ade no virus- me diate d overexpression of diacylglycerol kinase-zeta inhibits, endothelin-1-induced cardiomyocyte hypertrophy.

病毒介导的二酰甘油激酶-zeta 过度表达抑制内皮素-1 诱导的心肌细胞肥大。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Circulation 111
• 作者: Yahagi et al.;A.Ishikawa;Toya et al.;Ishikawa A;Katagiri et al.;A.Ishikawa;Takahashi et al.
• 通讯作者: Takahashi et al.

Differential Regulation of Diacylglycerol Kinase Isozymes in Cardiac Hypertrophy.

心脏肥大中二酰甘油激酶同工酶的差异调节。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochem. Biophys. Res. Comm. 332
• 作者: Yahagi et al.

Gene expression, cellular localization and enzymatic activity of diacylglycerol kinase isozymes in rat ovary and placenta.

大鼠卵巢和胎盘中二酰甘油激酶同工酶的基因表达、细胞定位和酶活性。

• 期刊: Cell Tissue Res. in press
• 作者: Toya;M. et al.
• 通讯作者: M. et al.

Expression and localization of diaylglycerol kinase isozymes and enzymatic features in rat lung.

二酰甘油激酶同工酶的表达和定位以及大鼠肺中的酶学特征。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Am.J.Physiol.Lung Cell Mol.Physiol. 288
• 作者: Katagiri Y;et al.
• 通讯作者: et al.