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膵癌細胞と膵星細胞の細胞間相互作用におけるWISP-1遺伝子の役割

WISP-1基因在胰腺癌细胞与胰腺星状细胞细胞间相互作用中的作用

基本信息

批准号：
17790455
负责人：
河邉顕
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790455/
关键词：
膵癌膵星細胞細胞間相互作用 WISP-1

项目摘要

本研究では膵の線維化に中心的役割をしている膵星細胞(PSC)に注目し、PSCと膵癌細胞の細胞間相互作用についてCCN familyの一つであるWISP-1に焦点をあて、その機能解析を行った。1)ラット膵星細胞(PSC)の単離・培養雄性Lewisラットの膵臓を単離し、コラゲナーゼ処理、Optiprepによる密度勾配遠心法により、高い純度、生存率でPSCの単離培養が可能であった。2)膵癌細胞株(DSL6A/C1)とPSCにおけるCCN family遺伝子の発現解析Lewisラットから単離培養したPSCとLewisラット膵癌細胞株DSL6A/C1からそれぞれmRNAを単離し、RT-PCRにてCCN family遺伝子群の発現解析を行った。結果CTGF、 Cyr61、WISP-2はPSCとDSL6a/C1ともに発現を認めたが、WISP-1の発現はPSCのみで発現を認めた。3)WISP-1強制発現膵癌細胞株の樹立と解析RT-PCRでクローニングしたWISP-1遺伝子からWISP-1発現ベクターを作成し、リポフェクションにてDSL6A/C1細胞を導入した。薬剤選択で4種類のクローン細胞が得られた。発現解析の結果、残念なことにWISP-1遺伝子の発現は認めなかったが、各細胞株は形態的、また増殖能、接着能、運動能に違いを認めたので、現在詳細を解析中である。4)WISP-1と分泌型増殖因子との相互作用の検討膵癌細胞に対するWISP-1の影響を検討する目的で、ラットまたはヒト膵癌細胞株DSL6A/C1、PANC-1、MiaPaCa-2にWISP-1遺伝子をtransientに導入し、その増殖能、運動・接着能などの変化について現在解析中である。さらに、他の分泌性増殖因子(TGF-beta familyやPDGFなど)やサイトカイン・ケモカインとWISP-1との相互作用についても検討している。

In this study, we focused on the interaction between satellite cells (PSC) and cancer cells in the CCN family and analyzed the function of WISP-1. 1) Isolation and culture of PSC male Lewis cells, isolation, treatment, Optiprep, density matching, high purity, survival rate, isolation culture of PSC are possible. 2) Analysis of CCN family gene expression in cancer cell line (DSL6A/C1) and PSC in Lewis culture and PCR analysis of CCN family gene expression in DSL6A/C1. Results CTGF, Cyr61, WISP-2 and WISP-1 were found to be related to PSC 6a/C1. 3) Establishment and analysis of WISP-1 stress-induced cancer cell lines RT-PCR analysis of WISP-1 gene expression in DSL6A/C1 cells The four types of cells selected from the group were selected for the study. The results of the analysis, the identification of the WISP-1 gene, the morphology of each cell line, the growth ability, the adhesion ability, and the movement ability are now analyzed in detail. 4) To investigate the interaction between WISP-1 and secretory growth factors in cancer cells. Objective: To investigate the effects of WISP-1 on cancer cell lines DSL6A/C1, PANC-1, MiaPaCa-2, WISP-1 gene transfection, proliferation, motility and adhesion. In addition, other secretory growth factors (TGF-beta family and PDGF) are involved in the interaction between WISP-1 and TGF-beta family.