Gene Manipulation of Huge DNA by Super Artificial Restriction Enzyme

超级人工限制性酶对巨大DNA进行基因操作

• 批准号: 18001001
• 负责人: KOMIYAMA Makoto
• 金额: $ 275.97万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Specially Promoted Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18001001/
• 关键词: DNA; 制限酵素; ペプチド核酸; 遺伝子組換え; セリウム; 核酸; 遺伝子; ゲノム; バイオテクノロジー; 遺伝子操作

We developed man-made tools (super artificial restriction enzyme) which cut double-stranded DNA at desired site with desired site-specificity. Even huge genomic DNA (e.g., the genome of human beings composed of 3x10^9 base-pairs) was selectively hydrolyzed at one target site. The scission fragments were connected with foreign DNA using DNA ligase, and the recombinant DNA was successfully expressed in mammalian cells. Furthermore, the site-selective scissions by the super artificial restriction enzyme were satisfactorily recognized by the repair system in human cells and promoted the desired homologous recombination. High potential of the super artificial restriction enzyme for future applications has been indicated.

我们开发了人造工具（超级人工限制酶），该工具在所需的位点特异性上切割了所需位置的双链DNA。在一个靶位点选择性水解了巨大的基因组DNA（例如，由3x10^9碱基对组成的人类的基因组）也被选择性地水解。使用DNA连接酶与外源DNA连接，并在哺乳动物细胞中成功表达重组DNA。此外，超级人工限制酶通过人工细胞的修复系统令人满意地识别出站点选择性的剪裁，并促进了所需的同源重组。已经指出了对未来应用的超级人工限制酶的高潜力。

项目成果

Human Telomeric DNA Sequence-Specific Cleaving by G-Quadruplex Formation

• DOI: 10.1021/ja807313x
• 发表时间: 2009-03-04
• 期刊: JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
• 影响因子: 15
• 作者: Xu, Yan;Suzuki, Yuta;Komiyama, Makoto
• 通讯作者: Komiyama, Makoto

Chiral introduction of positive charges to PNA for double-duplex invasion to versatile sequences

• DOI: 10.1093/nar/gkm1154
• 发表时间: 2008-03-01
• 期刊: NUCLEIC ACIDS RESEARCH
• 影响因子: 14.9
• 作者: Ishizuka, Takumi;Yoshida, Junya;Komiyama, Makoto
• 通讯作者: Komiyama, Makoto

Precise Site-Selective Termination of DNA Replication by Caging The 3-Position of Thymidine and Its Application to Polymerase Chain Reaction

• DOI: 10.1021/bc900254e
• 发表时间: 2009-10-01
• 期刊: BIOCONJUGATE CHEMISTRY
• 影响因子: 4.7
• 作者: Kuzuya, Akinori;Okada, Fuminori;Komiyama, Makoto
• 通讯作者: Komiyama, Makoto

超分子サイエンス&テクノロジー(国武豊喜編, 人工ヌクレアーゼ)

超分子科学与技术（国武丰编、人工核酸酶）

• 发表时间: 2009
• 作者: 小宮山眞;他
• 通讯作者: 他

Caged-nucleotideを利用した二重鎖末端の制限酵素フリーなマニピュレーション

使用笼状核苷酸对双链末端进行无限制性酶操作

• 发表时间: 2008
• 作者: 岡田 文徳;他;堅田仁;任宜;葛谷明紀;宮島佳孝;愛場雄一郎;Yuta Suzuki;Keita Tanaka;Hitoshi Katada;Yoshitaka Miyajima;Takumi Ishizuka;Yuichiro Aiba;愛場雄一郎;宮島佳孝;徐岩 他;神長邦行 他;廣畑洋平 他;田中啓太 他;田中啓太 他
• 通讯作者: 田中啓太 他