マウスES細胞から成熟内胚葉系細胞への選択的分化誘導法の確立とその応用の研究

小鼠ES细胞向成熟内胚层细胞选择性分化诱导方法的建立及应用研究

• 批准号: 18790459
• 负责人: 多田 真輔
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790459/
• 关键词: 内胚葉系細胞; マイクロアレイ; 分化誘導; 肝細胞

我々がすでに確立しているマウスES細胞から内胚葉系細胞への分化誘導系を用いて内中胚葉細胞を分化誘導した後、内胚葉系前駆細胞のみをソーティングにより抽出、さらにHNF6などの内胚葉系遺伝子の効率的な分化誘導法を検討した結果、いくつかの成長因子や液性因子を組み合わせ、かつある種のコラーゲンコーティングを施した培養皿でさらに分化誘導を行うことで、比較的効率的にHNF6などの内胚葉系遺伝子が誘導されることを証明した。現在のところ選択的に次なる段階の内胚葉系細胞を誘導することは可能となっていないが、成熟内胚葉系細胞への分化過程の次なるステップへ進む可能性が示されたことは、目的とする細胞を純化しかつ大量に獲得するという目的を果たすという意味において、重要な成果であったといえる。すでに確立した内胚葉分化誘導系の中で、大量に獲得できる細胞分画であるGoosecoid陽性Eカドヘリン陽性分画(内胚葉系前駆細胞分画)とGoosecoid陽性Eカドヘリン陰性分画(中胚葉系細胞)をDNAマイクロアレイでの比較解析にて、いくつかの遺伝子が内胚葉系前駆細胞分画に特異的に発現することを確認した。その中で、ある接着因子がマウス胚の内胚葉系細胞にのみ発現していることをin situ hybridizationにより証明した。この方法が内胚葉分化にかかわる遺伝子など、重要な分子の拾い上げに有効な方法であることが示された。また、Goosecoid陽性E-カドヘリン陽性分画、またその分画から確立した数ヶ月間継代培養可能な内胚葉系細胞株のin vivoでの応用研究では、マウスへの細胞移植実験での生着率が低く、更なる工夫が必要であると考えている。

I have established a differentiation induction system for ES cells and endodermal cells using endodermal cells. Differentiation induction method for efficient extraction of posterior and anterior endodermal cells of the endodermal lineage and the extraction of endodermal lineage HNF6を検あしたRESULT, いくつかのgrowth factor や合わせ, かつあるkind のコラーゲンコーティングを士した Pei The comparative efficiency of HNF6's endodermal leaf lineage inducing differentiation induction was demonstrated. It is possible to induce endodermal lineage cells at different stages of selection now. Differentiation process of mature endoderm cells The possibility is shown and the target cell is purified and a large amount is obtained.というpurposeをfruitたすというmeans において, important result であったといえる. The endodermal differentiation induction line has been established and a large number of cells have been obtained. Comparative analysis of d positive EKT ヘリン negative division (mesodermal lineage cells) and DNA マイクロアレイでのにて, いくつかの缝子がEndodermal lineage anterior stem cell division and specific に発appears and することをconfirmationした.その中で、あるThen the factor がマウスEmbryo のEndodermal lineage cells にのみ発 appear していることをin situ hybridization によりprove した.この法がEndodermal differentiation にかかわる伝子など、important molecule のpickupげにeffective な法であることが Show された.また, Goosecoid-positive E-カドヘリン-positive division, またその牫からestablished, endodermal lineage cell line that can be cultured in several months The research on the use of vivo and cell transplantation is very low, and the time and effort required for cell transplantation are very low.