权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

腫瘍選択的なin vivo用人工遺伝子デリバリーシステムの開発

肿瘤选择性体内人工基因递送系统的开发

基本信息

批准号：
07F07195
负责人：
原島秀吉
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07195/
关键词：
オクタアルギニン多機能性エンベロープ型ナノ構造体 MEND マクロピノサイトーシスソルビトールオクタグアニジンオクタアルギニン(R8)トランスフェリンエンドサイトーシス dual ligand

项目摘要

オクタアルギニン(R8)は、細胞膜透過性ペプチドとして優れた細胞送達性を示すことが明らかになっている。R8で表面修飾した多機能性エンベロープ型ナノ構造体(MEND)は強力な遺伝子導入力を示し、優れたエンドソーム脱出能があることを報告している。平成20年度は、R8のエンドソーム脱出機構をオクタリジン(K8)と比較することにより解析した。その結果、R8とK8は共にマクロピノサイトーシスを誘起して同程度の効率で細胞内へ侵入することが明らかになった。エンドソーム脱出機構を両者で比較したところ、R8の方がK8よりも効率的に脱出することが明らかとなった。両者の脱出機構を解明するため、エンドソームの酸性化を阻止するバフィロマイシン存在下で比較したところ、R8は感受性を示し、K8は非感受性であった。In vitroの実験系で、FRETの原理を用いて膜融合能を両者で比較したところ、K8-リポソームは中性条件下でのみ膜融合を示し、R8-リボソームは中性でも酸性でも膜融合を示した。この結果は、細胞系の実験結果と良く対応し、R8-リポソームはマクロピノサイトーシスで取込まれた後、エンドソーム内が酸性になっても効率的に脱出できるのに対して、K8-リポソームは酸性になると脱出できないことが明らかとなった。本研究成果は、細胞膜透過性ペプチドの細胞内動態特性における新たなメカニズムの発見であり、この領域で高く評価されている。さらに、韓国のChung教授と共同で、ソルビトールを基盤とした新しい細胞膜透過性素子(G8)に基づいたデリバリーシステムの開発を行ない、G8でMENDの表面を修飾することにより、高い遺伝子発現が可能となった。また、本新規デバイスは、pDNAやsiRNAをコア形成にも有用であることを初めて明らかにした。

The cell membrane permeability of the cell membrane can be improved by increasing the cell transmissibility. R8 surface modification, versatility, and structure (MEND) are reported to demonstrate strong carrier introduction and release capabilities. Heisei 20 years ago, R8 and the development of the mechanism to open the door (K8) and compare the analysis As a result, R8 and K8 have the same effect on intracellular invasion. For example, if you want to get rid of the R8, you can get rid of it. In the presence of the acid reaction mechanism, R8 is sensitive and K8 is not sensitive. In vitro, FRET principle is applied to membrane fusion, K8-free membrane fusion under neutral conditions, R8-free membrane fusion under neutral conditions. The results showed that the cell lines were well matched, R8-poly was well matched, K8-poly was well matched, acid was well matched, acid was well matched, K8-poly was well matched. The results of this study are new to the development of intracellular dynamic characteristics of cell membrane permeability and high evaluation in this field. In addition, Professor Chung of South Korea has jointly developed a new cell membrane permeability factor (G8) for the substrate, and a new cell membrane permeability factor (G8) for the surface modification of the G8 MEND. This new regulation is useful for the formation of pDNA siRNAs.