SAGE法とCAST法による消化管癌のがん幹細胞の同定・解析とその診断への応用

SAGE和CAST方法对胃肠癌干细胞的鉴定和分析及其在诊断中的应用

• 批准号: 19390101
• 负责人: 安井 弥
• 金额: $ 12.06万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19390101/
• 关键词: 消化管癌; がん幹細胞; SAGE法; CAST法; 診断; 治療感受性; 食道癌; 胃癌

SAGE法およびCAST法により食道癌、胃癌のがん幹細胞マーカーを同定し、これらの癌に対する新しい治療感受性診断系を確立することを目的として、最終年度となる本年度は以下のとおり実施した。1)SAGE法によって抽出された消化管癌特異的発現遺伝子とがん幹細胞昨年度に引き続いて、食道扁平上皮癌のSAGE解析を行ない、新たに食道癌で発現が充進している遺伝子として、ADAMTS16, SPARC, KLK10, BLMH, EGRI, NRD1, SUFUなどを同定した。定量的RT-PCRではADAMTS16は食道癌の40%において過剰発現し、RNA干渉により、食道癌細胞株の増殖能および浸潤能は有意に抑制された。がん幹細胞との関連を明らかにするために、免疫組織化学的解析を行なった。胃癌のSAGE解析により同定したGW112は、高分化腺癌とともに小腸の幹細胞に発現していた。2)CAST法によって抽出された胃癌特異的膜蛋白・分泌蛋白コード遺伝子とがん幹細胞胃癌細胞株MKN-28およびMKN-1では、side population cellがそれぞれ2.2%、0.8%存在することが確認されている。この2細胞株および正常胃粘膜についてCAST法を用いて網羅的に膜蛋白・分泌蛋白コード遺伝子を探索した。その結果、MKN-1では331遺伝子、MKN-28では283遺伝子が抽出され、67遺伝子についての定量的RT-PCR解析から、DMKN, PCDHB9, BST2, DSC2などの候補遺伝子を抽出した。免疫染色による発現解析、細胞生物学的機能解析を行なった。DSC2の発現解析では、胃癌では低分化よりも高分化に発現しており、一方、食道では幹細胞よりも分化した細胞に発現が認められた。得られた成果は、がん幹細胞とプロジェニター細胞との形態学的比較、がん幹細胞を標的とした診断・治療開発につながるものと期待される。

SAGE and CAST methods are used to establish new diagnostic systems for esophageal cancer and gastric cancer. 1)SAGE method to extract digestive tract cancer-specific development genes, stem cells, esophageal squamous cell carcinoma SAGE analysis, new esophageal cancer development, ADAMTS16, SPARC, KLK10, BLMH, EGRI, NRD1, SUFU, etc. Quantitative RT-PCR analysis of ADAMTS16 showed that 40% of esophageal cancer cells were found to be infected, RNA stem cells were infected, and proliferation and invasion of esophageal cancer cells were intentionally inhibited. Stem cell and immune histochemical analysis SAGE analysis of gastric cancer is consistent with GW112, and stem cells from well-differentiated adenocarcinoma are found in the small intestine. 2)CAST method was used to extract gastric cancer specific membrane protein and secretory protein, and the presence of MKN-28 and MKN-1 stem cells and side population cells was 2.2% and 0.8% respectively. These 2 cell lines were used to explore membrane proteins and secretory proteins in normal gastric mucosa. Results, MKN-1 Immunostaining analysis, functional analysis of cell biology DSC2 development analysis, gastric cancer is not low differentiation, high differentiation, one side, esophagus is not stem cell differentiation, cell development The results of this study were compared with the morphology of stem cells, and the results of stem cell diagnosis and treatment development were compared with those of other studies.

项目成果

Positive immunohistochemical staining of gamma-H2AX is associated with tumor progression in gastric cancers from radiation-exposed patients

γ-H2AX 免疫组织化学染色阳性与辐射暴露患者胃癌的肿瘤进展相关

• 发表时间: 2008
• 期刊: Oncol Rep 20
• 作者: Ueno M;Kidoya H;Katoh SY;Fukuhara S;Hayashi H;Satoh N;Kidoya H;Kuniyasu H;Huang X;Oue N;Iwanaga A;Noguchi T;Yamada Y;Yasui W;Sentani K;Yamada Y;Tonchev AB;Sentani K;Ishida Y;Miyagawa K;Vachkov IH;Ossandon F;Nishioka T;Sentani K
• 通讯作者: Sentani K

網羅的遺伝子解析法で同定されたPLUNCは胃原発hepatoid adenocarcinomaの新規マーカーである

通过综合遗传分析确定PLUNC是原发性胃肝样腺癌的新标志物

• 发表时间: 2007
• 作者: 仙谷和弘;安井 弥
• 通讯作者: 安井 弥

Immunohistochemical analysis and serum concentration of Reg IV in patients with esophageal cancer

食管癌患者Reg IV的免疫组织化学分析及血清浓度

• 发表时间: 2008
• 作者: Anami K;Yasui W
• 通讯作者: Yasui W

DNA demethylation of Vascular endothelial growth factor-C is associated with gene expression and its possible involvement of lymphangiogenesis in gastric cancer

• DOI: 10.1002/ijc.22433
• 发表时间: 2007-04-15
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER
• 影响因子: 6.4
• 作者: Matsumura, Shunji;Oue, Naohide;Yasui, Wataru
• 通讯作者: Yasui, Wataru

Reg IV and claudin-18 are novel markers in the diagnosis of gastrointestinal signet ring cell carcinoma

Reg IV 和 Claudin-18 是诊断胃肠道印戒细胞癌的新标志物

• 发表时间: 2008
• 作者: Sentani K;Yasui W
• 通讯作者: Yasui W