脱ユビキチン化酵素によるシナプスー核間情報伝達の仕組みの解明

去泛素化酶阐明突触核信息传递机制

• 批准号: 19500271
• 负责人: 田 慶宝
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19500271/
• 关键词: シナプス; 脱ユビキチン化酵素; 細胞核; 情報伝達; ユビキチン; プロテアソーム

本研究では「USP48がimportinによりシナプスから核へ運般されるシグナル分子である」という作業仮説の検証と、importinをキャリアーとするシナプス-核間情報伝達の仕組み、さらにUSP48という脱ユビキチン化酵素のシナプス伝達とその制御(シナプス可塑性)における役割、およびその破綻による病理像の解明を目的とする。平成19年度の研究は神経細胞におけるUSP48の核移行メカニズムの解析に重点を置いた。その中で、主な成果は以下である。1。USP48及び神経細胞の部位特異的抗体(MAP2,Tau-1,PSD-95)やDAPIによる核染色などを用いて、初代培養神経細胞の三重免疫染色を行い、神経細胞におけるUSP48の局在を解明した。2。緑色蛍光タンパク質GFPと融合した種々USP48欠失変異体を初代培養の海馬神経細胞に導入し、野生型や変異型USP48の局在を共焦点レーザー顕微鏡を用いてリアルタイムに観察し、核移行ドメインを同定した。3。Cre-LoxPシステムを用いたコンディションナルノックアウトマウスの作製するためのtargeting vectorはすでに作製済みである。

The purpose of this study is to investigate the mechanism of IPM in USP48, and to clarify the mechanism of IPM in USP48. The focus of the study was on the analysis of nuclear migration in neurons and USP48 in Heisei 19. The main result is the following. 1。USP48 and site-specific antibodies to neurons (MAP2,Tau-1,PSD-95) and DAPI were used for nuclear staining, triple immunostaining of primary cultured neurons, and USP48 was detected in neurons. 2。Green light from GFP fusion to UP48 mutant was introduced into primary cultured hippocampal cells, wild-type and UP48 mutant were observed simultaneously with confocal microscopy. 3。Cre-Lox-P system is used to control the targeting vector.

项目成果

Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase IIalpha clusters are associated with stable lipid rafts and their formation traps PSD-95

Ca2 /钙调蛋白依赖性蛋白激酶 IIα 簇与稳定的脂筏及其形成陷阱相关 PSD-95

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Neurochemistry 104(3)
• 作者: Suzuki T;Du F;Tian QB;Zhang J;Endo S
• 通讯作者: Endo S