がん特異的融合タンパク質の分解を阻害する脱ユビキチン化酵素と分子標的治療

抑制癌症特异性融合蛋白降解的去泛素酶和分子靶向治疗

基本信息

批准号：
21H02777
负责人：
内藤幹彦
金额：
$ 11.23万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

慢性骨髄性白血病細胞に発現しているBCR-ABLと同様に細胞内の脱ユビキチン化酵素によって細胞内で安定に存在できるがん特異的融合タンパク質を探索するために、各種がん細胞を非特異的脱ユビキチン化酵素阻害剤PR619で処理し、融合タンパク質の発現量をウェスタンブロットで解析した。その結果、非小細胞肺がん細胞株H2228ではPR619処理によってEML4-ALKタンパク質量が約34％にまで減少した。同様に肺腺がん細胞LC-2/adではCCDC-RETタンパク質が4％に減少し、軟骨肉腫細胞A673ではEWS-FLI1タンパク質が約50％に減少した。一方で膀胱がん細胞RT-4ではFGFR-TACC3の発現量はそれほど変化が見られなかった。これらの結果から、少なくともいくつかのがん特異的融合タンパク質は脱ユビキチン化酵素によってがん細胞内で安定に存在できることが示唆された。膀胱がん細胞RT-4で発現しているFGFR-TACC3の分解を誘導するために、KHS108（TACC3リガンド）とLCL161(IAPリガンド)をリンカーで繋いだキメラ化合物SNIPER(TACC3)-11を新規に開発した。SNIPER(TACC3)-11はFGFR3及びTACC3タンパク質の量には影響を与えず、融合タンパク質FGFR-TACC3を選択的に減少させる活性を示した。またSNIPER(TACC3)-11は、FGFR-TACC3を発現するRT-4細胞に対して選択的な増殖阻害活性を示した。これらの結果からSNIPER(TACC3)-11はFGFR-TACC3を発現するがん細胞に対する選択的な治療薬となる可能性が考えられた。

为了搜索细胞内通过去泛素酶在细胞中稳定存在的癌症特异性融合蛋白，类似于在慢性髓样白血病细胞中表达的BCR-ABL，用非特异性去偶联蛋白酶抑制剂PR619处理了各种癌细胞，并通过Western blot分析了融合蛋白的表达水平。结果，在非小细胞肺癌细胞系H2228中，通过使用PR619处理，EML4-ALK蛋白的量减少至约34％。同样，在肺腺癌细胞LC-2/AD中，CCDC-RET蛋白降低至4％，而在软骨肉瘤细胞A673中，EWS-FLI1蛋白降低至约50％。另一方面，在膀胱癌细胞RT-4的FGFR-TACC3表达水平上未观察到显着变化。这些结果表明，至少某些癌症特异性融合蛋白可以通过去泛素酶稳定地存在于癌细胞中。为了诱导在膀胱癌细胞RT-4中表达的FGFR-TACC3的降解，我们开发了一种与KHS108（TACC3配体）和LCL161（IAP Ligand）相关的嵌合复合狙击（TACC3）-11 -11 -11 -11 -11。狙击手（TACC3）-11对FGFR3和TACC3蛋白的量没有影响，并且表现出活性以选择性地减少融合蛋白FGFR-TACC3。此外，狙击手（TACC3）-11表现出针对表达FGFR-TACC3的RT-4细胞的选择性生长抑制活性。这些结果表明，狙击手（TACC3）-11可能是表达FGFR-TACC3的癌细胞的选择性治疗剂。

项目成果

期刊论文数量（40）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

次世代医薬とバイオ医療、第９章新しい創薬手法ー標的タンパク質を分解するPROTAC

下一代医学和生物医学，第9章新药发现方法-降解靶蛋白的PROTAC

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
内藤幹彦（長野哲雄;川西徹編）
通讯作者：
川西徹編）

Hybrid molecule between platanic acid and LCL-161 as a yes-associated protein degrader

铂酸和 LCL-161 之间的混合分子作为 yes 相关蛋白降解剂

DOI：
10.1093/jb/mvac021
发表时间：
2022
期刊：
The Journal of Biochemistry
影响因子：
0
作者：
Nakano Naoko;Fukuda Kazuo;Tashiro Etsu;Ishikawa Haruka;Nagano Waka;Kawamoto Rie;Mori Alice;Watanabe Misao;Yamazaki Ryu;Nakane Takahisa;Naito Mikihiko;Okamoto Iwao;Itoh Susumu
通讯作者：
Itoh Susumu

Case Western Reserve University(米国)

凯斯西储大学（美国）