局所麻酔薬のDNA脱メチル化による腫瘍細胞増殖抑制および致死機序の解明

局麻药 DNA 去甲基化阐明肿瘤细胞生长抑制和致死机制

• 批准号: 24592305
• 负责人: 鬼塚 信
• 金额: $ 3.49万
• 依托单位: University of Miyazaki
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24592305/
• 关键词: DNA脱メチル化; 局所麻酔薬; リドカイン; 癌抑制遺伝子; プロカイン

麻酔薬や麻酔方法の違いによる癌の進行、転移、あるいは予後への影響が注目されている。研究代表者らは、局所麻酔薬が臨床使用濃度以下で悪性腫瘍細胞の増殖を抑制、細胞死を誘導することを報告した。最近、エピジェネティックな考えからDNAのメチル化と癌化との関係が注目され、DNAの脱メチル化剤は、癌抑制遺伝子の発現を増加し、細胞死を誘導する分子標的抗癌剤として臨床応用されている。一方、局所麻酔薬プロカインがDNAを脱メチル化するとの報告がある(Villar et al. Cancer Res. 2003 ; 63 : 4984-9.)。DNAのメチル化とは、DNAのシトシン塩基の5位末端の水素イオンがメチル基に置換されることであり、遺伝子の発現が抑制される。逆にメチル基が外れ脱メチル化されると遺伝子の発現が活発になる。本研究の目的は、種々の局所麻酔薬によるDNAの脱メチル化の作用機序を解明し、局所麻酔薬により腫瘍細胞増殖抑制や細胞死を誘導することを検証し、癌患者の麻酔や術後鎮痛に局所麻酔薬を使用することの有用性を示すことである。まず、リアルタイムPCR法を用いて、リドカインなどの局所麻酔薬の暴露で腫瘍細胞においてp53、p21などの癌抑制遺伝子の発現増加を観察した。一方、メチル化DNAと特異的に結合するモノクローナル抗体を用いて、ドットプロットを行った結果、リドカインやプロカインを暴露した細胞群では、メチル化DNAが相対的に増加した。さらに、制限酵素を用いてメチル化DNAを選択的に切断処理後、定量的リアルタイムPCRで定量した結果、リドカインやプロカインを暴露した細胞群では、メチル化DNAの増加がみられた。これらの結果、リドカイン等の局所麻酔薬はDNAを脱メチル化することで、腫瘍細胞においてメチル化されて発現が抑制されているp53、p21等の癌抑制遺伝子の発現を増加し、アポトーシスを誘導しうることが考えられた。

The cancer progression, migration, and post-treatment effects of the method of anesthesia are noted. The researchers report that all anesthetics inhibit proliferation and induce cell death at concentrations below clinical use. Recently, the relationship between DNA transformation and cancer has been noticed, the development of DNA de-transformation agents and cancer suppressor genes has increased, and the clinical use of molecular target anticancer agents induced by cell death has been studied. A report on the development of DNA sequencing has been published (Villar et al. Cancer Res. 2003 ; 63 : 4984-9.) DNA methylation, DNA methylation, 5-terminal amino acid substitution, gene expression inhibition In the case of the reverse transformation of the base, the development of the gene is active. The aim of this study was to elucidate the mechanism of DNA cleavage in the presence of tumor suppressor, to demonstrate the usefulness of tumor suppressor in the presence of tumor suppressor and in the presence of tumor suppressor in cancer patients and in postoperative analgesia. To detect the increased expression of p53, p21 and tumor suppressor genes in tumor cells exposed to these drugs by PCR One way, the DNA and specific binding, the use of antibodies, the results, the exposure of cell populations, the increase in the DNA and related After the isolation treatment, quantitative PCR was performed, and the cell population was exposed to the enzyme. As a result, local anesthetic drugs such as Riedkanin can decompose DNA, inhibit the development of tumor cells, increase the development of cancer-suppressing genes such as p53 and p21, and induce apoptosis.