Protein engineering and reaction control technology targeting thermolysin for the expansion of its use in food industry

针对嗜热菌蛋白酶的蛋白质工程和反应控制技术，扩大其在食品工业中的用途

• 批准号: 20380061
• 负责人: INOUYE Kuniyo
• 金额: $ 10.23万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20380061/
• 关键词: 酵素化学酵素利用学; 酵素; 蛋白質工学; 反応制御; ペプチド; 食品; プロテアーゼ; サーモライシン; 部位特異的変異導入

Thermolysin (TLN) is a thermostable neutral metalloproteinase produced in the culture broth of Bacillus thermoproteolyticus. It is widely used for the peptide bond formation through reverse reaction of hydrolysis. In this study, for the expansion of the use of TLN in food industry, we increased the activity and stability of TLN and altered its substrate specificity using protein engineering and reaction control technology.

热素（TLN）是一种在芽孢杆菌热蛋白溶解剂培养基中产生的可热稳定金属蛋白酶。通过水解的反应，它被广泛用于肽键形成。在这项研究中，为了扩大食品行业中TLN的使用，我们提高了TLN的活动和稳定性，并使用蛋白质工程和反应控制技术改变了其底物的特异性。

项目成果

大豆ホエー中のKunitzトリプシンインヒビターの選択的プロテアーゼ分解に関する検討

大豆乳清中Kunitz胰蛋白酶抑制剂的选择性蛋白酶降解研究

• 发表时间: 2008
• 作者: 津村和伸;金森二朗;釘宮渉;井上國世
• 通讯作者: 井上國世

Regulation of the activity and stability of thermolysin by zinc and other divalent cations(シンポジウム:亜鉛タンパク質をキーワードにした異分野交流)

锌等二价阳离子对嗜热菌蛋白酶活性和稳定性的调节（研讨会：以锌蛋白为关键词的跨学科交流）

• 发表时间: 2011
• 作者: 井上國世;橋田泰彦
• 通讯作者: 橋田泰彦

サーモライシンのS_1サブサイトに存在するPhe114残基の役割

嗜热菌蛋白酶 S_1 亚位点中 Phe114 残基的作用

• 发表时间: 2010
• 作者: 樋爪彩子;兒島憲二;井上國世
• 通讯作者: 井上國世

溶媒効果分光法によるThermolysin(TLN)のチロシン残基およびトリプトファン残基の存在状態の解析

通过溶剂效应光谱分析嗜热菌蛋白酶 (TLN) 中酪氨酸和色氨酸残基的存在状态

• 发表时间: 2010
• 作者: 村山浩一;井上國世
• 通讯作者: 井上國世

コムギ由来α-アミラーゼ阻害剤0.19AIの阻害活性におけるチロシン残基の関与

酪氨酸残基参与小麦来源的α-淀粉酶抑制剂0.19AI的抑制活性

• 发表时间: 2008
• 作者: 河瀬美紀;井上國世
• 通讯作者: 井上國世