マイクロRNAによる薬物トランスポーターの発現制御と遺伝子多型影響の解明

microRNA对药物转运蛋白表达的控制及遗传多态性效应的阐明

• 批准号: 20590554
• 负责人: 斎藤 嘉朗
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20590554/
• 关键词: 薬剤反応性; ゲノム; 薬理学; 薬物トランスポーター; 転写因子; グノム

薬物に対する生体の反応性(薬物応答性)には著しい個体差や人種差が認められ、その一因としてアミノ酸置換や転写制御領域の遺伝子多型が報告されているものの、これらの情報のみでは薬物応答性を予測することは難しい。本研究は、3'-非翻訳領域がマイクロRNAの制御に重要や役割を果たしていることに着目し、3'-非翻訳領域の遺伝子多型影響を検討するものである。昨年度に引き続き、新たに配列解析を行ったヒト薬物動態関連分子(ATP7A等の薬物トランスポーター3種)の3'-非翻訳領域に存在する遺伝子多型(約35種)を対象に、遺伝子多型による塩基の置換前および置換後の2条件につき、多型付近の配列を用いて結合可能性を有するマイクロRNAを探索した。インターネットで利用できる既存のマイクロRNAデータベースを用いた検索に加え、動物種間での保存性も考慮した。その結果、ATP7Aの1多型(*1911G>C、日本人頻度0.325)が、has-miR-146aおよびhas-miR-146a-5pとの推定結合において5'末から7塩基目とseed配列中にあり、有力と推定されたため、以下のインビトロ解析に供することとした。市販のヒト腎臓cDNAを鋳型として、3'-非翻訳領域をfidelityの高い酵素を用いてPCR増幅後、クローニングした。蛍ルシフェラーゼ遺伝子を有するベクターを用いて、ルシフェラーゼ遺伝子の翻訳終止コドン直下に、クローニングした3'-非翻訳領域を導入した。

薬 content に す seaborne る raw body の anti 応 sex (薬 応 answer sex) に は the し い individual difference や people differentiae が recognize め ら れ, そ の due と し て ア ミ ノ acid replacement や planning write suppression area の heritage 伝 son polymorphism が report さ れ て い る も の の, こ れ ら の intelligence の み で は 薬 content 応 a sexual を be す る こ と は difficult し い. This study は, 3 '- not turn 訳 field が マ イ ク ロ RNA の suppression に important や "を cut fruit た し て い る こ と に mesh し, 3' - do not turn の 訳 field but 伝 polymorphism influence を beg す 検 る も の で あ る. Yesterday annual に lead き 続 き, new た に match column line analytical を っ た ヒ ト 薬 content dynamic masato even molecules (ATP7A の 薬 content ト ラ ン ス ポ ー タ ー three) の 3 '- not turn に 訳 field exist す る heritage 伝 son polymorphism (about 35) を like に polices, but 伝 polymorphism に よ る salt base の replacement before お よ び の 2 conditions after displacement に つ き, more pay nearly の matched with column を い て The possibility of combining を includes する, する,, ロ, RNAを, and exploring た. イ ン タ ー ネ ッ ト で using で き る existing の マ イ ク ロ RNA デ ー タ ベ ー ス を with い た 検 cable に え, animal species で の save sex も consider し た. そ の results, ATP7A の 1 polymorphism (1911 g > C * 0.325), Japanese frequency が, has - miR - 146 - a お よ び has - miR - 146 - a - 5 p と の presumption of combining に お い て 5 'end か ら 7 salt base mesh と seed with column に あ り, strong presumption と さ れ た た め, the following の イ ン ビ ト ロ parsing に For する とと た た. City dealers の ヒ ト renal viscera cDNA を type where と し て, 3 '- not turn 訳 field を fidelity の high を use い い enzyme て PCR raised after painting, ク ロ ー ニ ン グ し た. 蛍 ル シ フ ェ ラ ー ゼ heritage 伝 son を す る ベ ク タ ー を with い て, ル シ フ ェ ラ ー ゼ posthumous son 伝 の turn 訳 termination コ ド ン straight に, ク ロ ー ニ ン グ し た 3 '- not turn 訳 field を import し た.

项目成果

スルホニルウレア受容体SUR2をコードするABCC9遺伝子の多型探索およびハプロタイプ解析

磺酰脲类受体SUR2编码ABCC9基因多态性搜索及单倍型分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 滝上裕一,細山田真,木村真規,柴崎敏昭;細山田真;斎藤嘉朗
• 通讯作者: 斎藤嘉朗