Wirkungsweise von molekularen Chaperonen und Proteasen in der Faltung und Degradation von Proteinen im Cytosol

[晓雨-0920交稿][晓雨-0920交稿]Proteine Sowie zur Kontrolle der Aktitiität和稳定的调节器Proteine。Bisheriger and ZukünfTiger ForschungsschwerPunkt der Antragsteller ISDe分析von Chaperonen and Proteasen des细胞质，麻省理工学院大肠杆菌ALS hauptsächlicem modellOrganmus and dri mittelfristigen Zielen。Estens soll bstimt den，Wie Chaperone die Faltung neusyntisierter Proteine，die Solubilisierung and Rück Faltung aggerter Proteine die Aktitiitätskontrolle nativer Regulator Proteine in E.Coli and Höherer Zellen vermitteln.Zweitens Sollen augewählte Chaperone and Proteasen，Indesondere Hsp70，Triggerfaktor and Hsp100(CLP)Proteine，hinsichtlich irer Strukur-Funktionsbeziehungen分析。根据对大肠杆菌变形杆菌的检测，确定了溶模机械师。Zu den zentalen explestentellen ansätzen gehören umfassende Identifizierungen auch geringster Proteinmengen nach 2D-Gelelektrophrese，H/D-Austauschestente，or Spezifische Quervernetzung MIT anschlieçender Identifizierung der Query Ververnetzten Aminosäuren Sowie Proteingster Proteinster Nach 2D-Gelelektrophrese，H/D-AustauschExamente，or Spezifische Quervernetzung MIT anschlieüder Identifizierung der Query Ververnetzten Aminosäuren Sowie Proteingster Proteinmengen Nach 2D-GelelektroPhorese，H/D-Austauschestente，or SpezifischeDese Untersuhugen erdern den kombinierten einatz des vorhandenen ESI-Tandem-Quadrupol-TOF-Massenspecktroeter and des Beantragten MALDI-TOF/TOF-Massenspecktroeter.

Molekulare Chaperone und Proteasen bilden ein funktionelles Netzwerk zur Faltung und Qualitätskontrolle zellulärer Proteine sowie zur Kontrolle der Aktivität und Stabilität regulatorischer Proteine. Bisheriger und zukünftiger Forschungsschwerpunkt der Antragsteller ist die Analyse von Chaperonen und Proteasen des Cytosols, mit E. coli als hauptsächlichem Modellorganismus und drei mittelfristigen Zielen. Erstens soll bestimmt werden, wie Chaperone die Faltung neusynthetisierter Proteine, die Solubilisierung und Rückfaltung aggregierter Proteine sowie die Aktivitätskontrolle nativer Regulatorproteine in E. coli und höherer Zellen vermitteln. Zweitens sollen ausgewählte Chaperone und Proteasen, insbesondere Hsp70, Triggerfaktor und Hsp100 (Clp) Proteine, hinsichtlich ihrer Struktur-Funktionsbeziehungen analysiert werden. Drittens sollen die Mechanismen der Substratselektivität von E. coli Proteasen bestimmt werden. Zu den zentralen experimentellen Ansätzen gehören umfassende Identifizierungen auch geringster Proteinmengen nach 2D-Gelelektrophorese, H/D-Austauschexperimente, ortsspezifische Quervernetzung mit anschließender Identifizierung der quervernetzten Aminosäuren sowie Protein-footprinting. Diese Untersuchungen erfordern den kombinierten Einsatz des vorhandenen ESI-Tandem-Quadrupol-Tof-Massenspektrometers und des beantragten MALDI-TOF/TOF-Massenspektrometers.