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Wirkungsweise von molekularen Chaperonen und Proteasen in der Faltung und Degradation von Proteinen im Cytosol

分子伴侣和蛋白酶在细胞质中蛋白质折叠和降解中的作用模式

基本信息

批准号：
5377707
负责人：
Professor Dr. Bernd Bukau
金额：
--
依托单位：
Zentrum für Molekulare Biologie (ZMBH)
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
2002
资助国家：
德国
起止时间：
2001-12-31 至 2005-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5377707?language=en
关键词：
Wirkungsweise von molekularen Chaperonen und

项目摘要

Molekulare Chaperone und Proteasen bilden ein funktionelles Netzwerk zur Faltung und Qualitätskontrolle zellulärer Proteine sowie zur Kontrolle der Aktivität und Stabilität regulatorischer Proteine. Bisheriger und zukünftiger Forschungsschwerpunkt der Antragsteller ist die Analyse von Chaperonen und Proteasen des Cytosols, mit E. coli als hauptsächlichem Modellorganismus und drei mittelfristigen Zielen. Erstens soll bestimmt werden, wie Chaperone die Faltung neusynthetisierter Proteine, die Solubilisierung und Rückfaltung aggregierter Proteine sowie die Aktivitätskontrolle nativer Regulatorproteine in E. coli und höherer Zellen vermitteln. Zweitens sollen ausgewählte Chaperone und Proteasen, insbesondere Hsp70, Triggerfaktor und Hsp100 (Clp) Proteine, hinsichtlich ihrer Struktur-Funktionsbeziehungen analysiert werden. Drittens sollen die Mechanismen der Substratselektivität von E. coli Proteasen bestimmt werden. Zu den zentralen experimentellen Ansätzen gehören umfassende Identifizierungen auch geringster Proteinmengen nach 2D-Gelelektrophorese, H/D-Austauschexperimente, ortsspezifische Quervernetzung mit anschließender Identifizierung der quervernetzten Aminosäuren sowie Protein-footprinting. Diese Untersuchungen erfordern den kombinierten Einsatz des vorhandenen ESI-Tandem-Quadrupol-Tof-Massenspektrometers und des beantragten MALDI-TOF/TOF-Massenspektrometers.

Molekulare Chaperone und Proteasen bilden ein funktionelles Netzwerk zur Faltung und Qualitätskontrolle zellulärer Proteine sowie zur Kontrolle der Aktivität und Stabilität regulatorischer Proteine.利用E. coli als hauptsächlichem Modellorganismus und drei mittelfristigen Zielen.因此，我们将韦尔登作为新合成蛋白质、溶解蛋白质和聚集蛋白质的分子伴侣，来控制天然调节蛋白质在大肠杆菌中的活性。coli和höherer Zellen vermitteln。两种蛋白质都是分子伴侣和蛋白质，分别是Hsp 70、Triggerfaktor和Hsp 100（Clp）蛋白质，它们的结构功能可以通过韦尔登进行分析。Drittens sollen die Mechanismen der Substratselektivität von E.大肠杆菌蛋白质估计为韦尔登。在2D-凝胶电泳、H/D-Austauschexperimente或Quervernetzung等实验中，Ansätzen也可以通过蛋白足迹法对蛋白质进行快速鉴定。本文研究了串联四极质谱仪和串联MALDI-TOF/TOF质谱仪的联用。