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細胞刺激に伴う転写活性化とヒストン修飾のダイナミクス

细胞刺激时转录激活和组蛋白修饰的动态

基本信息

批准号：
09J40035
负责人：
林陽子
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒストンは、真核生物のクロマチンを構成するタンパク質であり、その多様な翻訳後修飾は、遺伝子発現調節を始め、老化、癌化、細胞周期など様々な現象に関わる。これまでに、この蛍光標識Fabを用いた生細胞観察系をピストンH3のメチル化やアセチル化に応用し、様々なヒストン修飾について観察に着手した。今年度は、この生細胞観察系を用いて、脱アセチル化酵素阻害剤によるヒストンアセチル化の動態変化の解析を行った。ヒストンH3リジン9番目(K9)のアセチル化を認識する蛍光標識Fabを細胞に導入し、脱アセチル化酵素阻害剤であるトリコスタチンAを加えた。その結果、H3K9のアセチル化の増加に伴い、蛍光標識Fabが核内に集積していく様子を観察することができた。一方で、このアセチル化の増加とともに、転写の不活性化に働くH3K9のジメチル化修飾の量は減少していた。今年度は、これまでのヒストンH3に加え、ピストンH4に対する様々な修飾についても解析を進めた。種々のピストンH4修飾に対するモノクローナル抗体を用いた免疫染色の結果、アセチル化H4K5は細胞周期の複製期に、モノメチル化H4K20はG2期後期とM期に極めて高いレベルになることが明らかになった。また、これらの抗体を異なる波長の蛍光色素で標識し、さらにもう一つの修飾抗体を別な蛍光色素で標識することによって、様々なヒストン修飾の細胞周期における挙動を明らかとなり、この多重免疫蛍光染色の画像解析を行うことにより、定量的な解析も可能となった。

The growth of eukaryotes, eukaryotes and eukaryotes. In this paper, we use the Fab to observe the information of the computer, H3, and H3, and to change the usage of the computer. This year's annual health survey is based on the use of chemical enzymes to block the production of enzymes. H3

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

特異的モノクローナル抗体を用いたメチル化ヒストンダイナミクスの可視化

使用特定单克隆抗体可视化甲基化组蛋白动力学

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
実験医学エピジェネティクスと疾患
影响因子：
0
作者：
Tachiwana H;Kagawa W;Shiga T;Osakabe A;Miya Y;Saito K;Hayashi-Takanaka Y;Oda T;Sato M;Park SY;Kimura H;Kurumizaka H;Yamagata K;Tachiwana H.;木村宏
通讯作者：
木村宏

生細胞におけるヒストン修飾の可視化

活细胞中组蛋白修饰的可视化

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
Hayashi-Takanaka Y.;et al.;木村宏;Hayashi-Takanaka Y.;林陽子;Hayashi-Takanaka Y.;林陽子;林陽子
通讯作者：
林陽子

エピゲノム制御にかかわるヒストン修飾のイメージング

成像参与表观基因组调控的组蛋白修饰

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
医学のあゆみ
影响因子：
0
作者：
Tachiwana H;Kagawa W;Shiga T;Osakabe A;Miya Y;Saito K;Hayashi-Takanaka Y;Oda T;Sato M;Park SY;Kimura H;Kurumizaka H;Yamagata K;Tachiwana H.;木村宏;木村宏
通讯作者：
木村宏

ヒストンダイナミクスの可視化と膜透過細胞による再構成

使用透膜细胞观察组蛋白动力学和重建

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
実験医学(増刊号) 27
影响因子：
0
作者：
Hayashi-Takanaka Y.;et al.;木村宏
通讯作者：
木村宏

Visualization of DNA methylation and histone modifications in living cells

DOI：
10.1016/j.ceb.2010.02.004
发表时间：
2010-06-01
期刊：
CURRENT OPINION IN CELL BIOLOGY
影响因子：
7.5
作者：
Kimura, Hiroshi;Hayashi-Takanaka, Yoko;Yamagata, Kazuo
通讯作者：
Yamagata, Kazuo

DOI：
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中島俊思;林陽子;永尾悠生;木道圭子;Takayuki Harada;小嶋理江・荘島宏二郎
通讯作者：
小嶋理江・荘島宏二郎

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DOI：
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作者：
Uranbileg B;Soroida Y;et;al.;田中克宜;田中克宜;長谷川陽子;長谷川陽子;山田将臣;岩谷知美;濵田悦子;濵田悦子;濵田悦子;濵田悦子;濵田悦子;濵田悦子;監修 : 日本生理学会教育委員会(分担執筆);林陽子
通讯作者：
林陽子