Analysis of conformational changes of a G protein-coupled receptor that are propagated to a novel intracellular factor.

分析传播为新型细胞内因子的 G 蛋白偶联受体的构象变化。

• 批准号: 21790082
• 负责人: YOSHINAGA Sosuke
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21790082/
• 关键词: ケモカイン受容体; NMR; 構造生物学; 炎症性免疫疾患; 創薬

We succeeded in constructing a protein expression system for a novel intracellular factor FROUNT that regulates a chemokine receptor CCR2b using Escherichia coli cells and developing a protocol for the protein purification. Utilizing this system and protocol, we obtained large amounts of purified full-length FROUNT proteins that are enough for structural analyses. We elucidated that the purified FROUNT proteins possess CCR2b-binding activity with solution NMR and surface plasmon resonance. We also succeeded in constructing a protein expression system of full-length CCR2b using insect cells and developing a protocol for the protein purification.

我们成功地构建了一个新的细胞内因子FROUNT的蛋白质表达系统，该细胞内因子FROUNT使用大肠杆菌细胞调节趋化因子受体CCR2b，并开发了蛋白质纯化的方案。利用这个系统和协议，我们获得了大量的纯化的全长FROUNT蛋白，足以进行结构分析。我们阐明，纯化的FROUNT蛋白具有CCR2b结合活性与溶液NMR和表面等离子体共振。我们还成功地构建了全长CCR2b的昆虫细胞蛋白表达系统，并开发了蛋白纯化的方案。

项目成果

ケモカイン受容体と制御因子FROUNTとの相互作用に関する構造生物学的研究

趋化因子受体与调节因子FROUNT相互作用的结构生物学研究

• 发表时间: 2010
• 作者: Hashimoto Y;et al.;江崎芳
• 通讯作者: 江崎芳

ケモカインのシグナル伝達を制御する細胞内因子FROUNTの構造生物学的研究

控制趋化因子信号传导的细胞内因子 FROUNT 的结构生物学研究

• 发表时间: 2009
• 作者: Sugahara T;et al.;薗田晃弘
• 通讯作者: 薗田晃弘

ケモカイン受容体の細胞内シグナル伝達機構に関する構造生物学的研究

趋化因子受体细胞内信号转导机制的结构生物学研究

• 发表时间: 2009
• 作者: Funakoshi-Tago M;Nakamura K;Tsuruya R;Hatanaka M;Mashino T;Sonoda Y;Kasahara T.;柴田直紀;江崎芳
• 通讯作者: 江崎芳

溶液NMR法を用いたケモカイン受容体会合分子FROUNTの構造生物学的研究

使用溶液核磁共振法对趋化因子受体相关分子 FROUNT 进行结构生物学研究

• 发表时间: 2010
• 作者: Hashimoto;Y.;T.Shuto;S.Mizunoe;A.Tomita;T.Koga;T.Sato;M.Takeya;M.A.Suico;A.Niibori;T.Sugahara;S.Shimasaki;T.Sugiyama;B.Scholte,H.Kai.;辻辰一朗
• 通讯作者: 辻辰一朗

Expression and purification of human FROUNT, a common cytosolic regulator of CCR2 and CCR5

• DOI: 10.1016/j.pep.2010.12.012
• 发表时间: 2011-05-01
• 期刊: PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION
• 影响因子: 1.6
• 作者: Esaki, Kaori;Terashima, Yuya;Terasawa, Hiroaki
• 通讯作者: Terasawa, Hiroaki