Combined analysis of tertiary structure and function(s) of Clostridium botulinum type C and D phospholipase C

肉毒梭菌 C 型和 D 型磷脂酶 C 的三级结构和功能的联合分析

• 批准号: 21790421
• 负责人: SAKAGUCHI Yoshihiko
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: University of Miyazaki (2010)Okayama University (2009)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21790421/
• 关键词: ボツリヌス菌; ホスホリパーゼC; ウエルシュ菌α毒素; 卵黄活性; 溶血活性; ホスファチジルコリン; スフィンゴミエリン; リポソーム

Clostridium botulinum cultures are classified into seven types, types A to G, based on the antigenicity of the neurotoxins produced. Of these seven types, only types C and D produce phospholipase C (lecithinase, PLC) in addition to the neurotoxin. Phospholipase of C. perfringens is known as α-toxin, which is the best characterized of all clostridial phospholipases and is an important agent of gas gangrene. The toxin, which exhibits phospholipase C and sphingomyelinase (SMase) activities, causes hemolysis, necrosis, and death. Here we determined the PLC genes of C. botulinum type C and D (Cbotα and Dbotα) by using inverse PCR and primer walking, and expressed as a GST-fusion protein. We compare the enzymatic and biological activities (egg-yolk activity, hemolysis, and mouse lethality) of the purified protein of C. perfringens α-toxin, Cbotα, and Dbotα.

根据产生的神经毒素的抗原性，肉毒梭菌培养物被分为七种类型，类型A到G型。在这七种类型中，只有C型和D型除了神经毒素外，还会产生磷脂酶C(卵磷脂酶，PLC)。产气荚膜梭菌磷脂酶又称α毒素，是所有产气荚膜梭菌磷脂酶中最具特性的一种，是气性坏疽的重要致病因子。这种毒素具有磷脂酶C和鞘磷脂酶(SMase)的活性，会导致溶血、坏死和死亡。在此，我们用反向聚合酶链式反应和引物法测定了肉毒杆菌C型和D型(CBOTα和Dbotα)的plc基因，并以Gst融合蛋白的形式表达。我们比较了纯化的产气荚膜弧菌α毒素、α和Dbotα的酶活性和生物学活性(蛋黄活性、溶血和小鼠致死性)。

项目成果

A New Cytosolic Pathway from a Parkinson Disease-associated Kinase, BRPK/PINK1 ACTIVATION OF AKT VIA MTORC2

• DOI: 10.1074/jbc.m110.179390
• 发表时间: 2011-03-04
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Murata, Hitoshi;Sakaguchi, Masakiyo;Huh, Nam-ho
• 通讯作者: Huh, Nam-ho

C型とD型ポツリヌスC2毒素遺伝子をコードするプラスミドの解析

编码C型和D型肉毒杆菌C2毒素基因的质粒分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 阪口義彦;林哲也;山本由弥子;中山恵介;馬少博;張凱;田村臣哉;小熊恵二
• 通讯作者: 小熊恵二

多機能受容体RAGEの下流信号伝達機構の解明, BMB2010

阐明多功能受体RAGE、BMB2010的下游信号机制

• 发表时间: 2010
• 作者: 阪口政清;村田等;山本健一;小野智之;阪口義彦;本山晃;日比野利彦;片岡健;許南浩
• 通讯作者: 許南浩

A型ボツリヌス神経毒素の三叉神経節培養細胞への結合と取り込み

A 型肉毒杆菌神经毒素与培养的三叉神经节细胞的结合和摄取

• 发表时间: 2010
• 作者: 山本由弥子;張凱;Ni Nengah DwiFatmawati;申蓮花;馬少博;阪口義彦;鈴木智典;小熊惠二
• 通讯作者: 小熊惠二

Transcriptional regulation of a brown adipocyte-specific gene, UCP1, by KLF11 and KLF15

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2010.08.039
• 发表时间: 2010-09-10
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Yamamoto, Ken-ichi;Sakaguchi, Masakiyo;Huh, Nam-ho
• 通讯作者: Huh, Nam-ho