BTK gene targeting in a hematopoietic stem cell using an adenovirus adeno-associate virus hybrid vector

使用腺病毒腺相关病毒杂交载体靶向造血干细胞中的 BTK 基因

• 批准号: 21790996
• 负责人: OCHIAI Masayuki
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21790996/
• 关键词: 移植; 再生医療; 遺伝子; ウイルス; 移植・再生医療

For gene therapy of X-linked agammaglobulinemia, a helper-dependent adenovirus adeno-associated virus hybrid vector was constructed that contains Bruton' s tyrosin kinase gene. We analyzed an efficiency of targeted integration or gene repair through homologous recombination(HR) into hematopoietic stem cells(HSCs). The efficiency of HR reached 0. 073% per infected Nalm-6 cells. In HSCs derived human cord blood, integration was detected at 3. 6^* 10e-6 per spreading cells, and HR was revealed 0. 7% of those integrations. Furthermore, detection of integration or HR at DNA level by PCR revealed IgM positive-immature B cells that induced from HSCs. We also characterized chromosomal sites where the vector tends to integrate in a non-random manner by LAM-PCR.

为进行X连锁无丙种球蛋白血症的基因治疗，构建了含有布鲁顿酪氨酸激酶基因的辅助依赖型腺病毒-腺相关病毒杂合载体。我们分析了通过同源重组（HR）靶向整合或基因修复到造血干细胞（HSC）中的效率。HR的效率达到0。073%/感染的Nalm-6细胞。在HSC来源的人脐带血中，在3. 6 × 10 ~（-6）/铺展细胞，HR为0。7%的整合。此外，通过PCR检测整合或HR在DNA水平显示IgM阳性的未成熟B细胞诱导的HSC。我们还通过LAM-PCR表征了载体倾向于以非随机方式整合的染色体位点。

项目成果

アデノAAVハイブリッドベクターを用いたBTK遺伝子修復の試み

尝试使用腺病毒-AAV 混合载体修复 BTK 基因

• 发表时间: 2008
• 作者: 落合正行;石村匡崇;高田英俊ら
• 通讯作者: 高田英俊ら

相同組み換えによる遺伝子修復型の遺伝子治療法の開発

利用同源重组开发基因修复型基因疗法

• 发表时间: 2011
• 期刊: ら炎症と免疫
• 作者: 石村匡崇;山元裕之;落合正行ら
• 通讯作者: 落合正行ら

アデノAAVハイブリッドベクターを用いたBTKの遺伝子修復の試み

尝试使用腺-AAV杂合载体修复BTK

• 发表时间: 2009
• 作者: 落合正行、石村匡崇、高田英俊;ら
• 通讯作者: ら