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タンパク質の超高感度定量法の開発とその定量から理解する動物行動の変容

タンパク質の超高感度定量法の開発とその定量から理解する動物行動の変容
开发超灵敏蛋白质定量方法并通过其定量了解动物行为的变化
批准号：
21657022
负责人：
伊藤 悦朗
金额：
$1.98万
依托单位：
Tokushima Bunri University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2009 至 2010
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21657022/
关键词：
行動タンパク質ELISAチオNADサイクリング法CREBモノアラガイ行動学神経化学生物物理学脳・神経蛋白質

项目摘要

项目成果

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モノアラガイでの味覚嫌悪学習のキー・ニューロン内でのCREB1タンパク質の定量を試みるのが本研究の目的である。まずはその検出方法であるが、当該のタンパク質の抗体を用いたELISA法に、チオNAD酵素サイクリング法を組み合わせたものを適用し、極微量のタンパク質でも定量できるようにその測定方法の開発に努めた。サイクリング法での脱水素酵素として3α-hydroxysteroid dehydrogenaseを用い、かつ基質としては改変したandrosteroneを用いて、300回転/分以上のサイクリングを実現した。これは、androsteroneの17位を修飾することによって成功した。また酵素反応の至適条件も見直し、バッファー組成のリン酸基濃度を増やした。さらには、標識酵素としてアルカリホスファターゼまたはβガラクシダーゼのどちらを適用し、市販のプレートリーダーを用いた測定系で、10^<-20>moles/well以上の検出限界を達成できた。さて次に、CREB1タンパク質を、上述のアルカリホスファターゼを標識酵素として用いて定量してみた。しかしながら、現時点では高感度は得られておらず、行動変容に特に関与するニューロン1個内のCREB1タンパク質を定量できるまでには至っていない。問題点は、抗体の精度にあることは明らかとなったので、現在は、その抗体の精度を上げるように努めている。
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会议论文
Glutamate transporters in the central nervous system of a pond snail
池塘蜗牛中枢神经系统中的谷氨酸转运蛋白
DOI： --
发表时间： 2010
期刊： Journal of Neuroscience Research 88
影响因子： --
作者： [Hatakeyama D, Mita K, Kobayashi S, Sadamoto H, Fujito Y, Hiripi L, Elekes K, Ito E.]
通讯作者： Ito E.
Learning-dependent gene expression of CREB1 isoforms in the molluscan brain
DOI： 10.3389/fnbeh.2010.00025
发表时间： 2010-01-01
期刊： FRONTIERS IN BEHAVIORAL NEUROSCIENCE
影响因子： 3
作者： [Sadamoto, Hisayo, Kitahashi, Takashi, Ito, Etsuro]
通讯作者： Ito, Etsuro
新規な酵素基質とそれを用いるタンパク質および核酸の超高感度測定法
新型酶底物及使用其的蛋白质和核酸的超灵敏测量方法
DOI： --
发表时间： 2011
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
動物学の"進化"この10年の概念と技術の進展
动物学的“进化”：近10年概念与技术的发展
DOI： --
发表时间： 2009
期刊：
影响因子： --
作者： [Hatakeyama D, et al., 伊藤悦朗]
通讯作者： 伊藤悦朗
ダウン症候群に伴う急性巨核芽球性白血病発症の分子機構の解明と分子標的療法の開発
  • 批准号：
    23K21429
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $2.41万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    伊藤 悦朗
  • 依托单位：
    Hirosaki University
ダウン症候群に伴う骨髄性白血病の分子機構の解明と分子標的療法の開発
  • 批准号：
    24K02413
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.81万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    伊藤 悦朗
  • 依托单位：
    Hirosaki University
Clarification of the mechanism of multistep leukemogenesis of acute megakaryoblastic leukemia associated with Down syndrome and development of the molecular targeted therapy
  • 批准号：
    21H02877
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.07万
  • 财政年份：
    2021
  • 负责人：
    伊藤 悦朗
  • 依托单位：
    Hirosaki University
社会性適応のための行動変容機構の研究
  • 批准号：
    20033023
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $6.08万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    伊藤 悦朗
  • 依托单位：
    Tokushima Bunri University
海外基金