ヒトiPS細胞からの毛包バルジ幹細胞作成の試み

尝试利用人类 iPS 细胞制造毛囊膨出干细胞

基本信息

  • 批准号:
    11F01419
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.15万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2011
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2011 至 2012
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究の目的はヒトiPS細胞から毛包バルジ幹細胞の特性を有する細胞を誘導することである。本年度は、1)レチノイン酸とBMP4を用いたヒトiPS細胞からケラチノサイトへの誘導法の効率をさらに向上させるとともに2)ヒトケラチノサイトを毛包バルジの微細環境を模した環境におくとバルジマーカーの発現がみられるかどうかにつき検討した。iPS細胞からケラチノサイトへの誘導では、昨年度の結果をうけてレチノイン酸の濃度を1μMに固定し、1、5,10ng/mlの各濃度の組み換えBMP4と組合せて分化誘導した後、コラーゲンコートディッシュとケラチノサイト培地で培養し、ケラチン14の発現に基づきケラチノサイトへの誘導効率を評価した。その結果、いずれのBMP4の濃度でも20-30%のケラチン14陽性細胞を誘導できることが明らかとなった。つまり、1ng/mlと比較的低濃度のBMP4であっても高濃度の場合と比較して遜色ない効率でケラチン14陽性細胞を誘導できることが示された。毛包バルジ領域ではWNTシグナルが活生化されるとともにBMPシグナルが抑制されることが知られている。ヒトケラチノサイトにWNTシグナル系の活性化因子であるglycogen synthase kinase-3阻害剤CHIR99021(以下CHIRと略す)およびBMPシグナル阻害剤dorsomorphinを作用させ、ケラチン15、SOX9、LHX2、CD200などヒトバルジ細胞のマーカーの発現を遺伝子レベルで解析した。その結果、WNTシグナルの活性化、BMPシグナルの阻害の両方でバルジマーカーであるケラチン15の発現が増強した。また、両薬剤を併用することにより、ケラチン15の発現がより増加する傾向がみられ、同様の手法によりヒトiPS細胞由来ケラチノサイトにバルジ幹細胞の特性を与えることができる可能性が示された。
The aim of this study was to induce iPS cells to differentiate into hairy stem cells. This year, 1) iPS cells are used to increase the efficiency of induction methods, 2) iPS cells are used to increase the efficiency of induction methods, and 3) iPS cells are used to increase the efficiency of induction methods. iPS cells were induced by different concentrations of BMP4 and BMP4 at 1μM, 1 ng/ml, 5 ng/ml, and 10ng/ml, respectively. The induction rate of BMP4 and BMP4 was evaluated after the differentiation of iPS cells. The results showed that the concentration of BMP-4 was 20-30% and the positive cells of BMP-14 were induced. For low concentrations of BMP-4, 1ng/ml, and high concentrations, 1 ng/ml and 1 ng/ml were used to induce BMP-14 positive cells. WNT and BMP are active in the field of hair care. The activation factor of WNT system was detected by glycogen synthase kinase-3 inhibitor CHIR99021(hereinafter CHIR abbreviated) and BMP inhibitor dorsomorphin. The activation factor of WNT system was detected by enzyme analysis. As a result, the activation of WNT and the development of BMP inhibitors increased. The development of stem cells tends to increase with the use of different methods, and the origin of iPS cells is shown by the possibility of stem cell characteristics.

项目成果

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