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微細藻由来トリテルペン合成酵素の構造機能解析

微細藻由来トリテルペン合成酵素の構造機能解析
微藻三萜合酶的结构和功能分析
批准号：
12F02331
负责人：
阿部 郁朗
金额：
$0.77万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2012 至 2013
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12F02331/
关键词：
ボツリオコッセンボツリオコッセン合成酵素スクアレンスクアレン合成酵素酵素機能改変酵素構造機能解析結晶構造解析炭化水素生産機構

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项目成果

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ボツリオコッセンはスクアレンに類似し、ファルネシル二リン酸を基質として生合成されるが、その生成メカニズムはスクアレンとは異なっている。特定されたボツリオコッセン合成酵素遺伝子情報を利用し、ボツリオコッセン合成酵素およびスクアレン合成酵素のX線結晶構造解析を行い、本酵素の構造的特徴と炭化水素生産機構の解明をめざす。今回、我々は、微細藻Botryococcus braunii由来ボッリオコッセン合成酵素について、遺伝子のコドン改変およびタンパク質発現大腸菌の株の選択により、結晶化に必要な量の組換えタンパク質の得られる系を確立した。また、すでに結晶構造が明らかになっているヒト由来スクアレン合成酵素(SS)を鋳型としてSSL-1～3のホモロジーモデルを作成した結果、SSの72番目および288番目のフェニルアラニン、204番目のアラニンに相当するSSL-1～3の活性中心キャビティ構成アミノ酸残基が、各酵素の基質特異性と生成物特異性の制御に重要な役割を演じている可能性が示された。そこで活性中心キャビティの形状や容積を変化させることを目的とし、SSL-1～3における当該アミノ酸残基をグリシンやアラニン、セリンなどに置換した点変異体を各々設計し、これらの変異酵素を作成した。現在これら変異の導入が酵素活性に及ぼす影響について精査しているところでる。また、これら組み換え酵素を用いて、各タンパク質の結晶化の条件の検討に着手した。
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会议论文
アミノ酸変異導入によるBotryococcene合成酵素の触媒機能の解明
通过引入氨基酸突变阐明葡萄球菌烯合酶的催化功能
DOI： --
发表时间： 2013
期刊：
影响因子： --
作者： [Jon FFREEMAN, Dengfeng YANG, 木村篤人, 森田洋行, 岡田茂, 阿部郁朗]
通讯作者： 阿部郁朗
薬用天然物生合成の鍵となる新奇酵素の構造機能相関と合成生物学
  • 批准号：
    24KF0032
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.28万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    阿部 郁朗
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
薬用天然物の合成生物学に関する研究
  • 批准号：
    23KF0213
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.28万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    阿部 郁朗
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
薬用天然物の複雑骨格構築を担う新奇生合成酵素を用いた革新的次世代型天然物創薬
  • 批准号：
    23H00393
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 资助金额：
    $30.37万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    阿部 郁朗
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
薬用天然物の新奇生合成マシナリーの探索と精密機能解析に関する研究
  • 批准号：
    22KF0121
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.41万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    阿部 郁朗
  • 依托单位：
    The University of Tokyo