Die Bedeutung des Ets 1 Transkriptionsfaktors in der Regulation der Tumorinvasion

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Das Stroma maligner Tumoren trägt über die Produktion matrix-degradierender Metalloproteinasen und ihrer Aktivatoren (wie uPA) durch stromale Fibroblasten wesentlich zur Tumorinvasion bei. Eigene Befunde sprechen für eine wichtige Rolle des Ets 1 Transkriptionsfaktors für die Regulation der Aktivität dieser Enzyme. Im Rahmen des Projekts soll: 1.) die Rolle von Ets 1 für die transkriptionelle Regulation verschiedener Proteasen (MMP1, 2, 3 und 9 sowie uPA) in kultivierten Fibroblasten belegt werden. Hierzu soll die Proteaseninduktion mit und ohne eine Ets 1 Blockade (durch Antisenseoligodesoxy- oder sog. Decoy-Oligonukleotide) sowie vergleichend in Ets 1 +/+, Ets 1 +/- und Ets 1 -/- Fibroblasten (aus einer knock-out Maus) untersucht werden. 2.) Durch analoge Ansätze sollen weitere, für die Invasion relevante Zielgene von Ets 1 identifiziert werden. Hierzu sollen Fibroblasten mit Ets 1 induzierenden Faktoren stimuliert und dann mittels cDNA-Arrays die Expression bekannter Gene (z.B. Proteasen, Integrine) mit und ohne Ets 1 Blockade bzw. in Ets 1 -/- im Vergleich zu Ets 1 +/+ Fibroblasten untersucht werden. Durch die Technik der Suppressions-Subtraktions-Hybridisierung sollen neue Ets 1 Zielgene identifiziert werden. 3.) Da verschiedene Gewebe und ihre Tumoren unterschiedliche Ets 1 Spleißvarianten exprimieren (Vollängentranskript in Gliomen, Ets 1 DVII im Mammakarzinom, Ets 1 DIVDVII im Kolonkarzinom) sollen in Kotransfektionsassays (Ets 1 Expressionsvektoren und Proteasen-Promotoren enthaltende Reporterplasmide) die transaktivierenden Eigenschaften unterschiedlicher Ets 1 Translationsprodukte überprüft werden. Von den Ergebnissen der Analysen erhoffen wir uns neue Einsichten in die Rollen von Ets 1 für die transkriptionelle Regulation der Tumorinvasion.