リンパ球ホーミングを支配する高内皮細静脈に特異的な細胞動員シグナルの形成と制御

控制淋巴细胞归巢的高内皮小静脉特异性细胞募集信号的形成和调节

基本信息

批准号：
16043235
负责人：
田中稔之
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

【目的】高内皮細静脈(HEV)はリンパ球ホーミングの制御を通じて免疫監視の場の形成に必須の役割を担う。本研究ではHEVに発現するケモカインとケモカイン結合分子によって形成されるリンパ球動員シグナルの制御機構と免疫監視システムの場の形成における意義を明らかにするために解析を進め、以下の成果を得た。【結果と考察】(1)HEVに発現するCXCL13/BLCはB細胞のarrest chemokineとして機能する:我々はHEVに発現するCXCL13がB細胞ホーミングに重要な役割を担うことを報告している。本年度の研究を通じて、CXCL13が生理的なflow条件下でB細胞に作用してLFA-1あるいはα4β7インテグリン依存性にshear-resistantな細胞接着を誘導することが明らかになった。また、CXCL13刺激はB細胞において低分子量G蛋白質Rap1を活性化すること、また細胞接着誘導にはRapLが重要であることが示された。CXCL13はリンパ節HEVの管腔面発現し、CXCL13欠損マウス・腸間膜リンパ節HEVではB細胞接着が特異的に障害されていた。一方、CXCL13の局所投与によりCXCL13欠損HEVにおいてB細胞接着の回復が認められた。これらの結果からHEVに発現するCXCL13はB細胞に作用するarrest chemokineであることが初めて示された。(2)HEVとその近傍に発現するmac25/AGMやECMはケモカイン提示分子として機能する:mac25/angiomodulin(AGM)および細胞外基質(ECM)蛋白質とケモカインの結合特異性を表面プラズモン共鳴法を用いて解析した。その結果、mac25/AGMおよびfibronectin, collagen IVはCCL21,CXCL12,およびCXC13と結合するが、CCL19とは明らかな結合活性を示さなかった。また、変異CCL21を用いた解析から、CCL21とこれらの結合にはCCL21のC末端に存在する塩基性アミノ酸クラスターが重要であることが示唆された。Time-lapse解析の結果、これらのケモカイン結合分子に捕捉されたCCL21はリンパ球の遊走反応を誘導することが示された。これらの結果から、mac25/AGMやECM蛋白質がHEVとその近傍でケモカイン提示分子として機能することが示された。

目的：高内皮静脉（HEVS）通过控制淋巴细胞托管在免疫监测部位的形成中起着至关重要的作用。在这项研究中，我们进行了分析，以阐明由HEV表达的趋化因子和趋化因子结合分子形成的淋巴细胞募集信号的机制以及免疫监测系统领域形成的重要性，并获得了以下结果。 [结果与讨论]（1）在HEV中表达的CXCL13/BLC作为B细胞的抗趋化因子的作用：我们报告说，HEV中表达的CXCL13在B细胞归巢中起重要作用。通过今年的研究，揭示了CXCL13在生理流动条件下作用于B细胞，并以LFA-1或α4β7整联蛋白依赖性方式诱导抗剪切的细胞粘附。还表明，CXCL13刺激激活了B细胞中的低分子量G蛋白RAP1，而RAPL对于诱导细胞粘附很重要。 CXCL13是表达发光表面的淋巴结HEV，B细胞粘附在CXCL13缺陷型小鼠和肠系膜淋巴结HEV中特异性受损。另一方面，CXCL13的局部给药表明，在CXCL13缺乏的HEV中恢复了B细胞粘附。这些结果首次表明在HEV中表达的CXCL13是作用于B细胞的阻滞趋化因子。（2）在HEV附近表达的MAC25/AGM和ECM作为趋化因子呈递分子的作用：MAC25/Angiomodulin（AGM）的结合特异性（AGM）和细胞外基质（ECM）蛋白和趋化因子和趋化因子使用表面plasmon resonance分析。结果，MAC25/AGM和纤连蛋白，胶原蛋白IV与CCL21，CXCL12和CXC13结合，但并未显示与CCL19的明显结合活性。此外，使用突变CCL21的分析表明，CCL21 C末端存在的碱性氨基酸簇对于与CCL21的结合很重要。延时分析表明，这些趋化因子结合分子捕获的CCL21诱导淋巴细胞的迁移反应。这些结果表明，MAC25/AGM和ECM蛋白在HEV中和附近充当趋化因子的分子。