Regulation des Na+/HCO3--Kotransporters (NBC) in der Kolonschleimhaut: Pathophysiologische Bedeutung der basolateralen Anionenaufnahmemechanismen bei Mausmodellen chronisch-entzündlicher Darmerkrankungen

结肠粘膜 Na /HCO3 协同转运蛋白 (NBC) 的调节:慢性炎症性肠病小鼠模型基底外侧阴离子摄取机制的病理生理学意义

基本信息

项目摘要

Ziel des Antrages ist die Untersuchung der Regulation des intestinalen Na+/HCO3--Kotransporters (pNBC1), der die Aufnahme von HCO3- in den Enterozyten vermittelt. Die basolaterale Anionenaufnahme stellt den limitierenden Faktor für die intestinale Anionensekretion als elementare Funktion des Darmepithels dar, und Na+/HCO3--Kotransport spielt eine wichtige Rolle für die Bereitstellung von HCO3- zur Sekretion sowie als Cl--Importmechanismus zusammen mit Anionenaustausch und Na+/K+/2Cl--Kotransport (NKCC1). Die Gensequenz des pNBC1 unterscheidet sich von der des renalen kNBC1 nur im zytoplasmatischen N-Terminus; es gibt aber eine Reihe experimenteller Befunden für Unterschiede in Kopplungsverhältnis von Na+ und HCO3-, Transportrichtung und Regulation der beiden Subtypen. cAMP-Erhöhung stimuliert den intestinalen Subtyp, während der renale inhibiert wird. Welche Rolle andere Proteinkinasen, die für immer mehr Transportmechanismen als wichtig erkannte intrazelluläre Umverteilung sowie Adapterproteine und Zytoskelett in der Regulation des intestinalen Na+/HCO3--Kotransporters spielen, ist völlig unbekannt - ebenso, ob etwaige Unterschiede in der Regulation der Subtypen durch strukturelle Unterschiede oder Einfluss des Zelltyps bedingt sind. Diese Fragen wollen wir auf zellulärer Ebene am nativen Darmgewebe und an transfizierten Zelllinien mit funktionellen fluorometrischen sowie molekularbiologischen Untersuchungen, mittels konfokaler Laserscan-Mikroskopie sowie mit Affinitätschromatographie und MALDITOF angehen.
这是对肠道内HCO_3 ~-转运蛋白(pNBC_1)的调节作用的研究。基底外侧阴离子转运体对HCO 3-的阴离子转运作用有一定的限制作用,Na+/HCO 3--Kotransporter对HCO 3-的阴离子转运作用也有一定的限制作用。pNBC 1的基因序列分析表明,KNBC 1仅在酶质N端存在;这是一项用于研究Na+和HCO 3-的相互作用、转运和对其他亚型的调节的实验。cAMP-Erhöhung stimuliert den adenocarcinalen Subtype,während der renale inhibiert wird.蛋白激酶的作用及其在调节Na+/HCO 3-Kotransporters中的作用,在调节Zelltyps亚型时,通过结构的不确定性或对Zelltyps亚型的影响,可以发现其梅尔运输机制。该Fragen将在天然Darmgewebe上进行细胞培养,并通过功能性荧光分子生物学方法对Zelllinien进行细胞转染,使用Affinitätschromatographie和MALDITOF angehen进行激光扫描显微镜检查。

项目成果

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