Construction of protein distribution control system using ionic liquid/water two-phase system
利用离子液体/水两相体系构建蛋白质分布控制系统
基本信息
- 批准号:22K05221
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
構造をデザインしたイオン液体にわずかな水を添加した水和イオン液体を用いることで生体分子が高次構造を保持したまま溶解可能であり、溶解後の安定性が向上することを報告してきた。水和イオン液体中に溶解した生体分子を応用するための次の段階として、水和イオン液体中に溶解した生体分子を変性や大量希釈することなく簡便に水溶液中に移行させる方法の提案が必要である。本年度は、タンパク質の溶解した水和イオン液体中に濃度の異なる緩衝液を加えてイオン液体/水二相系を形成し、緩衝液中の塩濃度と加える緩衝液の体積が水相へのタンパク質の分配に及ぼす影響について検討を行った。多量の水を加えるとイオン液体/水二相系を形成するTetra-n-octyl ammonium dihydrogen phosphateを合成し、1イオンペアに3分子となるよう水和イオン液体を調整した。水和イオン液体中に熱変性をした糖鎖認識タンパク質(ConA)を溶解した。その後、塩濃度の異なる緩衝液を体積比の2倍となるよう加えて二相を形成し、水相中のConAの濃度を測定することで分配を解析した。その結果、緩衝液濃度が低いほどイオン液体相の含水率は低下傾向となり、タンパク質の水相中への分配は高くなった。イオン液体に対して、加える緩衝液の量が及ぼす影響について検討を行った結果、水和イオン液体に対して20倍量で最も分配率が高く、80%以上のConAが緩衝液相に分配した。イオン液体/水二相系を形成し、水相に分配したConAの糖鎖認識能を解析した結果、糖鎖認識能の再生が確認された。さらに、市販のConAをそのまま緩衝液中に溶解した結果に比べて高い糖鎖認識能を示した。
The structure of organic molecules is maintained by the addition of water and water, and the stability of organic molecules is improved after dissolution. It is necessary to propose a simple method for the migration of biological molecules in aqueous solutions. This year, we discussed the effects of buffer addition on the formation of liquid/water two-phase system, buffer concentration and buffer volume on the distribution of water phase and water phase. A large amount of water is added to form a Tetra-n-octyl ammonium dihydrogen phosphate two-phase system, and the three molecules are adjusted to water and water. Water and liquid are hot and soluble. The concentration of the two phases in the buffer solution was determined by a two-fold volumetric ratio. As a result, the buffer concentration tends to be low, the water content in the liquid phase tends to be low, and the distribution in the aqueous phase tends to be high. The amount of water and the amount of buffer solution added to the solution affected the results of the analysis. The maximum partition rate of water and the amount of buffer solution was higher than that of water and the amount of buffer solution was higher than 80%. The formation of liquid/water two-phase system, the distribution of water phase and the recognition of carbohydrate are analyzed and confirmed. The results of dissolution in buffer solution showed that the sugar chain recognition energy was higher than that of the control group.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hydration state of protein-stabilizing ionic liquids probed by ATR-IR and NMR spectroscopy
通过 ATR-IR 和 NMR 光谱探测蛋白质稳定离子液体的水合状态
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Navin Rajapriya Inbaraj;Subin Song; Ryongsok Chang;Kyoko Fujita;Tomohiro Hayashi
- 通讯作者:Tomohiro Hayashi
イオン液体の実用展開へ向けた最新動向
离子液体实际应用的最新趋势
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:天野 真宏;長谷川 昂平;森 拓也;西内 俊策;土井 一行;吉田 英樹;松岡 信;高橋 宏和;中園 幹生;村瀬 潤;小林 玄器;大内幸雄
- 通讯作者:大内幸雄
The state of water molecules induces changes in the topologies and interactions of G-quadruplex DNA aptamers in hydrated ionic liquid
水分子状态引起水合离子液体中 G-四链体 DNA 适体拓扑结构和相互作用的变化
- DOI:10.1016/j.molliq.2022.120175
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:6
- 作者:Fujita Kyoko;Honda Takuya;Tsukakoshi Kaori;Ohno Hiroyuki;Ikebukuro Kazunori
- 通讯作者:Ikebukuro Kazunori
水和イオン液体中の水和状態による核酸ア プタマーの四重鎖構造と相互作用変化
核酸适体的四链体结构和相互作用随水合离子液体中水合状态的变化
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:誉田 拓也;塚越 かおり;大野 弘幸;池袋 一典
- 通讯作者:池袋 一典
水和イオン液体を用いたセルラーゼ凝集体の溶解・リフォールディングに及ぼすイオン構造と含水量の影響
离子结构和含水量对水合离子液体溶解和重折叠纤维素酶聚集体的影响
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:小林 和音;伊藤 杏奈;柳澤 峻;市田 公美;藤田 恭子
- 通讯作者:藤田 恭子
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