SNAP-25のリン酸化がストレス反応機構において果たす役割の解明

阐明 SNAP-25 磷酸化在应激反应机制中的作用

• 批准号: 22K07601
• 负责人: 山森 早織
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07601/
• 关键词: ストレス; タンパク質リン酸化; 神経伝達物質; SNAP-25; 行動異常; 海馬; 遺伝子改変マウス; SNAREタンパク質; シナプス; リン酸化; 開口放出

心的外傷後ストレス障害（PTSD）では、強いストレスに直面した後に、その恐怖記憶が繰り返し想起され心身の疲弊が生じる。PTSDの発症機構は十分には解明されておらず、恐怖記憶の保持に関わる機構を明らかにすることは大きな課題となっている。本研究では、強いストレスにより脳内で誘導されるSNAP-25のリン酸化の意義と行動への影響を解明することを目指す。これまでに身体的あるいは心理的な、強いストレスによりマウスの脳の特定の領域でSNAP-25のSer187のリン酸化が上昇することを明らかにしている。令和４年度は、①強いストレスによりSNAP-25のリン酸化を生じるシナプス伝達経路について解析を行った。リン酸化SNAP-25抗体および、各神経伝達物質を放出するニューロンのマーカー分子の抗体を用いて、強いストレスを受けたマウスの脳の蛍光二重染色を行い、リン酸化の誘導に関与する可能性のある神経伝達物質を特定した。さらに、マウスの脳室内に、候補となる神経伝達物質を生体内濃度で投与して脳内のSNAP-25のリン酸化の変化を解析した。また、②SNAP-25のリン酸化による種々の神経伝達物質の放出の制御について解析を行った。脳より調整したシナプトソームを用い、神経伝達物質の放出能の差を解析するシステムの構築には成功した。野生型マウスのベースのSNAP-25のリン酸化は低いため、プロテインキナーゼＣの活性化剤を併用してSNAP-25のリン酸化を上昇させ、野生型マウスとSNAP-25非リン酸化型のノックインマウスの比較を試みたところ、数種の薬剤を検討したが膜の透過性に影響が生じることが明らかになった。そのため、SNAP-25恒常的リン酸化型のノックインマウスの作成を開始し、このマウスを利用して目的を達成するよう計画を変更した。

Post-Traumatic Disorder (PTSD) of the Heart, Strong Heart, Face to Face, and Horror Memory Return, Think of the Mind and Body, Fatigue, Health. PTSD's の発 syndrome organization is very clear and clear, and the horror memory maintenance and control agency is clear and clear. In this study, the significance and influence of the acidification of SNAP-25 in SNAP-25 was explained by the purpose of the study.これまでにphysical あるいはpsychologicalな、strong いストレスによりマウスの脳のspecific fieldでSNAP-25のSer187のリンAcidificationがRISEすることを明らかにしている. Reiwa 4th year, ① strong いストレスによりSNAP-25 acidified を生じるシナプス伝达経路についてanalytic を行った.リン SNAP-25 antibody および, each god's 経伝达 substance をrelease するニューロンのマーカーmolecule のantibodies いて, strong いスThe トレスを is subject to the けたマウスの脳の蛍光 Double Coloration を行い, the リンacidification のinducing に关 and the する possibility のある神経伝达matter をSpecific した.さらに, マウスの脳内に, candidate となる神経伝达 substance を in vivo concentration でinvestment and して脳内のSNAP-25 のリンacidified の変化をanalytic した.また、②SNAP-25のリンAcidificationによるkind々の神経伝达 substanceのreleaseのcontrolについてanalyticsを行った.脳より Adjustment したシナプトソームを Use い, 神経伝达 Material のrelease energy の difference を Analysis するシステムのConstruction には Success した. Wild-type マウスのベースのSNAP-25 acidified はlow いため, プロテインキしてSNAP-25 のリン acidification をrise させ and wild type used in combination with ナーゼCのactivating agentマウスとSNAP-25 non-リン acidified type のノックインマウスの comparison test みたところ, several kinds of の薬剤を検検したが film のpermeability に が生じることが明らかになった. Made of SNAP-25 constant acidified のノックインマウスのをStart し, このマウスをUse してpurpose をachieve するようplan を変change した.