Pathophysiological role of lipid stress induced by dead cell clearance in the development of NASH

非アルコール性脂肪性肝炎（NASH: non-alcoholic steatohepatitis）では肝細胞死の増加が特徴であり、慢性炎症や線維化の起点となると考えられる。申請者らは死細胞をマクロファージや線維芽細胞が取り囲み、貪食処理する病理学的構造としてCLS（crown-like structure）を報告した。CLS構成マクロファージは疾患特異的なマクロファージ亜集団であると考えられるが、これまでにコレステロール蓄積とリソソームストレス増強を示唆するデータを得ている。コレステロール負荷によるマクロファージの機能変容とそのメカニズムを明らかにするため、in vitro実験系の確立に取り組んだ。ヒト単球細胞株であるTHP-1から分化誘導したマクロファージとマウス細胞株であるRAW264マクロファージ、初代培養として腹腔内マクロファージと骨髄誘導性マクロファージ（BMDM）を用いてコレステロール結晶添加実験を行ったRAW264マクロファージではリソソーム関連タンパクと炎症・線維化促進因子の発現が増加したが、その他のマクロファージでは反応が認められなかった。リソソーム生合成を制御する転写因子TFE3（transcription factor E3）の免疫染色では、RAW264・BMDMともに核内移行が認められたが、リソソーム構成タンパクであるLAMP1の免疫染色においてBMDMではリソソーム量の減少が認められた。以上から、マクロファージの種類によってリソソームストレスに対する応答性が大きく異なることが明らかとなった。

非アルコール性脂肪性肝炎（NASH: non-alcoholic steatohepatitis）では肝細胞死の増加が特徴であり、慢性炎症や線維化の起点となると考えられる。申請者らは死細胞をマクロファージや線維芽細胞が取り囲み、貪食処理する病理学的構造としてCLS（crown-like structure）を報告した。CLS構成マクロファージは疾患特異的なマクロファージ亜集団であると考えられるが、これまでにコレステロール蓄積とリソソームストレス増強を示唆するデータを得ている。コレステロール負荷によるマクロファージの機能変容とそのメカニズムを明らかにするため、in vitro実験系の確立に取り組んだ。ヒト単球細胞株であるTHP-1から分化誘導したマクロファージとマウス細胞株であるRAW264マクロファージ、初代培養として腹腔内マクロファージと骨髄誘導性マクロファージ（BMDM）を用いてコレステロール結晶添加実験を行ったRAW264マクロファージではリソソーム関連タンパクと炎症・線維化促進因子の発現が増加したが、その他のマクロファージでは反応が認められなかった。リソソーム生合成を制御する転写因子TFE3（transcription factor E3）の免疫染色では、RAW264・BMDMともに核内移行が認められたが、リソソーム構成タンパクであるLAMP1の免疫染色においてBMDMではリソソーム量の減少が認められた。以上から、マクロファージの種類によってリソソームストレスに対する応答性が大きく異なることが明らかとなった。