自己免疫疾患の原因解明・制御を目的としたペプチドライブラリーによる原因抗原の解明

使用肽文库阐明致病抗原，以阐明和控制自身免疫性疾病的原因

• 批准号: 09877098
• 负责人: 笹月 健彦
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877098/
• 关键词: HLA; HLA-DR; 慢性関節リュウマチ; ペプチド

自己免疫疾患は、特定のHLAと相関することが知られている。その分子機構は疾患感受性のあるHLAに結合した何らかのペプチドによって活性化および増殖したT細胞が疾患の成立に大きく寄与していると考えられている。このようなペプチドを解析する新しい方法論として、ペプチドライブラリー法を検討した。代表的自己免疫疾患である慢性関節リウマチはHLA-DRB1*0405遺伝子と強い相関を示すことが知られ、DRB1*0405分子に結合した何らかのペプチドによって活性化および増殖したT細胞が関節組織において組織傷害を引き起こしているという仮説が考えられている。209種のペプチドの合成を行い、等量性のよりペプチドミクスチャーの合成に成功した。慢性関節リウマチ患者の関節液中のリンパ球の認識する抗原解析のために、このライブラリーペプチドおよび慢性関節リウマチと相関を示すHLA-DRB1*0405分子を発現したPBLを抗原提示細胞として利用し、慢性関節リウマチ患者の関節液中のリンパ球の増殖および株化およびその特異性の解析を行った。未知抗原の代わりにライブラリーペプチド(20^9種のペプチドを含む)を用いることで、関節液リンパ球がT細胞株として十分量増殖することが明きらかとなった。また、得られたT細胞株は、HLA-DRB1*0405を発現したトランスフェクタントを抗原提示細胞とした系で、20^9種を含むライブラリーペプチドおよび各アミノ酸ミックス部位を20のアミノ酸に展開した20^8種のサブライブラリーペプチド、180組中の特定のペプチド群に強い増殖反応を示した。すなわち、疾患と相関のあるHLA-DRB1*0405分子に拘束されたT細胞が選択的に増殖しており、これらのT細胞中に自己免疫応答に関与するT細胞が含まれている可能性が考えられた。今後、これらのT細胞株のこれまでに報告されている自己抗原(II型コラーゲン、熱ショックタンパク等)に対する反応性、関節液中の未知の自己抗原に対する反応性、ライブラリーペプチドへの反応パターンに基づいて既存のデータベースより検索された自己抗原ペプチドに対する反応性を検討することで、自己免疫現象に関与するペプチドの解析が進むものと考えられる。

Your immune system is related to specific HLA. The molecular machinery for disease susceptibility is HLA binding, activation, proliferation, and disease formation. The new methodology for the analysis of this problem is discussed. The expression of HLA-DRB1*0405 gene and strong correlation between DRB1 * 0405 and T cells represents the origin of chronic joint injury. The synthesis of 209 kinds of selection and selection was successful. Antigen analysis of the synovial fluid of patients with chronic arthritis and the correlation between HLA-DRB1*0405 molecular development and PBL antigen prompt cell utilization and the proliferation of synovial fluid of patients with chronic arthritis and the specificity of cell culture. Unknown antigen generation (20^9 species included) was used in the joint fluid and T cell lines. The T cell strain HLA-DRB1*0405 was found to be the antigen indicating cell line, 20^9 species, including 20^8 species, and 180 specific species. HLA-DRB1*0405 molecule is involved in the proliferation of T cell selection, and the possibility of T cell selection in T cell selection is examined. In the future, T cell lines will be reported as self-antigens.(Type II Serotype, Serotype II Serotype, Serotype II Ser

项目成果

Takeshita T.: "Identification of HLA-DQ6-derived peptide recognized by mouse MHC class I H-2Db-restricted CD8+. T cells in HIL-DQ6 transgenic mice." Jpn.J.Human Genet.vol.42. 225-232 (1997)

Takeshita T.：“HIL-DQ6 转基因小鼠中小鼠 MHC I 类 H-2Db 限制性 CD8.T 细胞识别的 HLA-DQ6 衍生肽的鉴定。”

Kimura A.: "Mutations in the cardiac troponin I gene associated with hypertrophic cardiomyopathy." Nature Genet.vol.16. 379-382 (1997)

Kimura A.：“与肥厚性心肌病相关的心肌肌钙蛋白 I 基因突变。”

Fukui Y.: "Positive and negative CD4_+ thymocyte selection by a single MHC class II/peptide ligand affected by its expression level in the thymus." Immunity. vol.6. 401-410 (1997)

Fukui Y.：“单个 MHC II 类/肽配体对 CD4_ 胸腺细胞的阳性和阴性选择受其在胸腺中表达水平的影响。”

Tana T.: "A HLA binding motif-aided peptide epitope library: A novel library design for the screening of HLA-DR4-restricted antigenic peptides recognized by CD4_+ T cells." J.Human Genet.(in press).

Tana T.：“HLA 结合基序辅助肽表位文库：一种用于筛选 CD4_T 细胞识别的 HLA-DR4 限制性抗原肽的新颖文库设计。”

Savoie CJ.: "MHC class I bound peptides of a colon carcinoma cell line,a Kiras gene-targeted progeny cell line and a B cell line." Cancer Letters. (in press).

Savoie CJ.：“结肠癌细胞系、Kiras 基因靶向子代细胞系和 B 细胞系的 MHC I 类结合肽。”