細胞外シグナルを制御する新しいプリンヌクレオチド代謝酵素

一种控制细胞外信号的新型嘌呤核苷酸代谢酶

• 批准号: 09877432
• 负责人: 堅田 利明
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877432/
• 关键词: リンパ球; アストロ細胞; CD38; PC-1; エクト型酵素; NADアーゼ; ホスホジエステラーゼ

先に申請者の研究グループは、レチノイン酸によるヒトHL-60細胞の好中球への分化過程でエクト型NAD分解酵素(NADase)が細胞表層に誘導され、この酵素活性がリンパ球表面抗原のCD38によって担われることを明らかにした。本研究では、細胞表層上の新しい機能分子と期待されるCD38及びこれと関連するプリンヌクレオチド代謝酵素につき、それらの生理機能と酵素化学的特性、転写調節の機構などを検討し、以下の知見を得た。1.IgG_1サブクラスに属する抗CD38モノクローン抗体でリンパ球系の細胞を刺激すると、複数の細胞内機能蛋白質がチロシンリン酸化されたが、この作用はCD38抗体のFc部分がFcγII受容体を刺激した結果であった。2、ラット脳の初代培養法により、各種のグリア、神経細胞を分取してラットCD38の局在を解析した結果、CD38はアストロ細胞に強く発現しており、またその細胞表層には顕著なNADase活性が認められた。さらに共焦点レーザー顕微鏡を用いた観察から、アストロ細胞のCD38は斑点(cluster)状の構造をとり、基質NADの添加によって細胞内陥入(internalization)することが明らかにされた。3、これらリンパ球系と神経系の細胞表層には、CD38とは別にヌクレオチドを基質とするPC-1様の酵素(phyrophosphatase/phosphodiesterase)活性が存在し、その一部は分泌型の性状を示した。4、推定された分泌型PC-1のN末端配列を決定し、プロセッシング部位を同定した。5、ヒトCD38遺伝子の遺伝子発現について解析し、核内レチノイン酸受容体のRAR(α)/RXRが結合する応答配列が第1イントロン上に存在することを見出した。

First, the applicants were asked to study the cell differentiation process of the HL-60 cell, the cell surface of NAD cleavage enzyme (NADase), the activity of the enzyme, the surface antigen of the ball, the surface antigen of the ball, the cell surface antigen, the cell surface antigen and the cell surface antigen. In this study, the new functional molecules in the cell table and the cell table are expected to be used in the study of CD38, physiological and chemical characteristics of enzymes, and the following information is obtained. 1.IgG_1 antigens belong to the cell system of anti-CD38 antibodies. Cell stimulation, multiplicity, intracellular protein activation, acidification, CD38 antibody Fc, Fc γ II receptor stimulation, cell stimulation, cytosolic stimulation, and immunoreaction. 2. The primary culture method was used to analyze the results of CD38, the results of CD38 were analyzed, and the activity of NADase was detected in the cell table. In the confocal point of view, the micrograph is used to observe the image, to make it in the shape of a CD38 (cluster), and to add a single cell (internalization) in the base NAD to make the image clear. 3. The activity of PC-1 enzyme (phyrophosphatase/phosphodiesterase) exists in the cells of the globe system, the cell surface of the cell, the activity of the enzyme (phyrophosphatase/phosphodiesterase) and the secretory type of the enzyme. 4. It is presumed that the N-terminal of secretory PC-1 should be arranged with the same location. 5. The combination of RAR (α)

项目成果

K.Kontani, et al.: "Signal transduction via the CD38/NAD^+ glycohydrolase." Adv.Exp.Med.Biol.419. 421-430 (1997)

K.Kontani 等人：“通过 CD38/NAD^ 糖水解酶进行信号转导。”

N. Tsujimoto, et al.: "Potentiation of chemotactic peptide-induced superoxide generation by CD38 ligation in human myeloid cell lines." J. Biochem.121. 949-956 (1997)

N. Tsujimoto 等人：“在人骨髓细胞系中通过 CD38 连接增强趋化肽诱导的超氧化物生成。”

S.Inoue, et al.: "Protein-tyrosine phosphorylation by IgGl-subclass CD38 monoclonal antibodies is mediated through stimulation of the FcγII receptors in human myeloid cell lines." J.Immunol.159. 5226-5232 (1997)

S.Inoue 等人：“IgG1 亚类 CD38 单克隆抗体的蛋白质酪氨酸磷酸化是通过刺激人骨髓细胞系中的 FcγII 受体介导的。”J.Immunol.159（1997）。

W. J. Malasisse, et al.: "Cyclic ADP-ribose measurements in rat pancreatic islets." Biochem. Biophys. Res. Commun.231. 546-548 (1997)

W. J. Malassisse 等人：“大鼠胰岛中的循环 ADP-核糖测量”。

M. Masuda, et al.: "Oscillation of ADP-ribosyl cyclase activity during the cell cycle and function of cyclic ADP-ribose in a unicellular organism, Euglena gracilis." FEBS Lett.405. 104-106 (1997)

M. Masuda 等人：“细胞周期期间 ADP-核糖基环化酶活性的振荡以及单细胞生物体小眼虫中环状 ADP-核糖的功能。”