全身性エリテマトーデスの予知的指標としての特異的遺伝子

作为系统性红斑狼疮预测指标的特定基因

• 批准号: 09877460
• 负责人: 佐々木 毅
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877460/
• 关键词: 自己抗体; V遺伝子; 全身性エリテマトーデス; 全身性エリテマトーデス(SLE); T細胞; ディファレンシャル、ディスプレイ法

1. 臓器障害性自己抗体VH遺伝子発現を指標とした臨床病態の追求。(1) ヒト末梢血単核球(PBL)サンプルを用いて臓器障害性抗DNA抗体遺伝子V3-7の検出をPCRにより計った。その結果、V3-7DNAは全身性エリテマトーデス(SLE)例PBLの他にも、健常人PBLにても検出できた。すなわち自己抗体遺伝子は末梢血リンパ球中に広く存在することが明らかとなった。SLEではsomatic mutationを有するIgM型B細胞クロンが存在することが特徴的であった。V3-7PBLでV3-7遺伝子検出は可能となったので、このmRNAの定量的把握が自己免疫疾患発現の早期診断あるいは治療効果判定上の指標となる可能性がある。(2) V3-7遺伝子の多型性について。ヒトPBL由来のDNAを用いてV3-7遺伝子の多型性とSLE病態との関連を追求した。V3-7特定の多型性はSLE骨髄(ループス腎炎)発現と相関した。2. SLE特異的遺伝子の検出及び臨床的意義の追求。SLE由来T細胞に特異的に発現する遺伝子を蛍光ディファレンシャルディスプレイ(D.D)法で検出することを試みた。(1)HTLV-1トランスフォームT細胞クローンよりSLE特異的に発現しているバンドを10、SLE特異的に発現が抑制されているバンドを16検出した。(2)これらより1つのSLE T細胞に特異的に発現が抑制されているフラグメントを得た。(3)同様に両親由来のT細胞クローンに発現し、SLEクローンにおいては未発現のフラグメントを得た。(4)各々のフラグメントについて、他のSLE或いは正常人由来クローンでの発現様式を検索した。(5)SLE T細胞に発現していたフラグメントについて他の正常人、SLE患者由来のT細胞でその発現を検討した。現時点で臨床での指標として極めて有用なDNAフラグメントの採取について成功しているとはいえない。が、D.D.法により、SLE T細胞に関連の深い遺伝子の採取が可能であることを認めたので、臨床及び病態上の意義の追求に役立てよう。

1。使用器官受损的自身抗体VH基因表达作为指标追求临床病理。 （1）使用人外周血单核细胞（PBL）样品通过PCR测量器官受损的抗DNA抗体基因V3-7。结果，除PBL外，在全身性红斑狼疮病例（SLE）病例的情况下，在健康的PBL中还检测到V3-7 DNA。换句话说，已经表明自身抗体基因在外周血淋巴细胞中广泛存在。 SLE的特征是存在具有体细胞突变的IgM B型细胞螺丝。由于通过V3-7PBL，V3-7基因检测已成为可能，因此对该mRNA的定量了解可能是早期诊断自身免疫性疾病发展或确定治疗有效性的指标。 （2）关于V3-7基因中的多态性。使用人类PBL的DNA，我们研究了V3-7基因和SLE病理学的多态性之间的关联。 V3-7特异性多态性与SLE骨髓（Lubos肾炎）表达相关。 2。检测SLE特异性基因和追求临床意义。我们试图通过荧光差分显示（D.D）方法检测在SLEDED的T细胞中特异性表达的基因。 （1）从HTLV-1转化T细胞克隆中检测到了10个特异性表达的SLE和16个频带的频段。 （2）通过这些，我们获得了在一个SLE T细胞中特异性抑制的片段。 （3）类似地，片段在父母的T细胞克隆中表达，并且在SLE克隆中未表达。 （4）对于每个片段，在其他SLE或正常的人类克隆中搜索表达模式。 （5）在其他正常人和SLE患者的T细胞中研究了在SLE T细胞上表达的片段的表达。目前，不可能说，作为临床指标非常有用的DNA片段的收集已经成功。但是，自D.D.已经认识到方法可以收集与SLE T细胞密切相关的基因，我们将使用此方法来帮助追求临床和病理意义。

项目成果

佐々木 毅: "自己抗体のターゲッティング療法" 最新医学社. 53(3). 240(774)-248(752) (1998)

Takeshi Sasaki：“自身抗体的靶向治疗”Shinsei Igakusha 53（3）240（774）-248（752）（1998）。

佐々木 毅: "自己免疫検査の診察での位置づけ" Medical Technology. 26. 974-977 (1998)

Takeshi Sasaki：“自身免疫检测在医学检查中的地位”《医疗技术》26. 974-977 (1998)。

Y.Koide, T.Sasaki, et al.: "Preparation of a monoclonal antibody specific for human staniocalcin." Biol.Pharm.Bull.21(12). 1352-1355 (1998)

Y.Koide、T.Sasaki 等人：“人斯钙素特异性单克隆抗体的制备”。

Y.Munakata, T.Sasaki, et al.: "Somatic mutation in autoantibody-assiciated VH genes of circulating IgM+IgD+ B cells." Eur.J.Immunol.28. 1435-1444 (1998)

Y.Munakata、T.Sasaki 等人：“循环 IgM IgD B 细胞的自身抗体相关 VH 基因的体细胞突变。”