リンパ球の発生分化における組み換え活性化遺伝子の転写調節機構の解明

阐明淋巴细胞发育和分化过程中重组激活基因的转录调控机制

• 批准号: 08839007
• 负责人: 村口 篤
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08839007/
• 关键词: T細胞受容体遺伝子; 免疫グロブリン遺伝子; 遺伝子再構成; リコンビナーゼ; RAG; プロモーター; 転写調節; サイトカイン

(1)RAG遺伝子の一部をプローブとして、ヒトRAG1ゲノム遺伝子を単離し、その構造およびプロモーター部位の解析を行った。RAG1の基本的転写を調節する塩基配列はRAG遺伝子第1エクソンの上流約100bpに位置するCCAATであった(Kurioka et al.Molecular lmmunol.1996)。(2)RAG1遺伝子の近傍のクロマチン構造をDNAase超感受性(HS)によって決定した。その結果、RAG1遺伝子の発現と相関するHS部位が数個あることが明らかとなった。これらのHS部位(プロモーター部位)をRAG1遺伝子を発現していない細胞に導入するとプロモーター活性があることが確認された。このことより、RAG1遺伝子の特異的発現はプロモーター領域のクロマチン構造の変化に依存することが明らかとなった(Kitagawa et al,Blood,1996)。(3)ヒトのリンパ球前駆細胞株を骨髄由来ストローマ細胞とサイトカインで刺激するとRAG遺伝子の発現が誘導されることを示した。また、その発現にはストローマ細胞上の分子とリンパ球前駆細胞の直接接触が必須であることを示した。さらにRAG遺伝子の発現とリコンビナーゼ活性が相関することを組み替え基質を用いて検証した(Tagoh,et al.Blood 1996)。(4)ディファレンシャルディスプレイ法を用いてストローマ細胞に発現しRAG遺伝子の発現を促進する新しい遺伝子を単離することに成功した。遺伝子の発現実験によりこの遺伝子がRAG遺伝子の発現に関与することが示された(Tagoh et al.BBRC,1996)。

(1) A part of RAG gene is divided into two parts: first, RAG gene is divided into three parts: first, RAG gene is divided into four parts: first, RAG gene is divided into three parts: first, RAG gene is divided into four parts: first, RAG gene is divided into three parts: first, RAG gene is divided into four parts: first, RAG RAG1 is regulated by its basic gene alignment, CCAAT, approximately 100bp upstream of RAG gene 1 (Kurioka et al. Molecular Immunol.1996). (2) DNA enzyme supersensitivity (HS) is determined by the structure of RAG1 gene. The results of RAG1 gene detection and correlation HS position are several. RAG1 gene was found in the HS site and was confirmed to be active. The special occurrence of RAG1 gene is dependent on the structural transformation of RAG1 gene (Kitagawa et al,Blood,1996). (3)The expression of RAG gene was induced by the stimulation of RAG gene. The first step is to make a direct contact with the cell. The development and activity of RAG genes have been demonstrated by the correlation between RAG gene expression and RAG gene expression (Tagoh,et al. Blood 1996). (4)The method of cell development promotes the development of new cells. The development of RAG genes is related to the development of RAG genes (Tagoh et al. BRC, 1996).

项目成果

Hiromi Tagoh,et al.: "Molecular cloning and characterization of a novel stromal cell-derived cDNA encoding a protein that facilitates gene activation of RAG-1 in human lymphoid progenitors." Biochemical and Biophysical Research Communications. 221. 744-74

Hiromi Tagoh 等人：“一种新型基质细胞衍生 cDNA 的分子克隆和表征，该 cDNA 编码促进人淋巴祖细胞中 RAG-1 基因激活的蛋白质。”

Hiromi Tagoh,et al.: "Induction of recombination activating gene expression in a human lymphoid progenitor cell line : requirement of two separate signals from stromal cells and cytokines." Blood. 88・12. 4463-4473 (1996)

Hiromi Tagoh 等人：“在人淋巴祖细胞系中诱导重组激活基因表达：需要来自基质细胞和细胞因子的两个单独信号”88・12 4463-4473。

Hideyuki Kurioka,et al.: "Isolation and Characterization of a TATA-less promoter for the human RAG-1 gene." Molecular Immunology. 33・13. 1059-1066 (1996)

Hideyuki Kurioka 等人：“人类 RAG-1 基因的无 TATA 启动子的分离和表征。”33·13（1996）。

Taro Kitagawa,et al.: "Chromatin structure and transcriptional regulation of human RAG-1 gene." Blood. 88・10. 3785-3791 (1996)

北川太郎等人：“人类 RAG-1 基因的染色质结构和转录调控”。88・10 3785-3791（1996）。