Wechselwirkungen zwischen Domänen der archaeellen Transkriptionsmaschinerie und Vergleich mit dem eukaryotischen System
古细菌转录机制域之间的相互作用以及与真核系统的比较
基本信息
- 批准号:75998638
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Units
- 财政年份:2008
- 资助国家:德国
- 起止时间:2007-12-31 至 2010-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Die RNA Polymerase (RNAP) der Archaeen synthetisiert im Gegensatz zu den spezialisierten eukaryotischen RNA Polymerasen sowohl mRNA, als auch tRNA und rRNA. Sie weist jedoch sowohl in ihrer Quartärstruktur als auch den Sequenzen ihrer Untereinheiten große Ähnlichkeiten zur eukaryotischen RNA Polymerase II aus der Hefe auf, weshalb sie ein vorzügliches Modellsystem zur Untersuchung der eukaryotischen Transkription darstellt. Kürzlich haben wir die RNAP aus dem hyperthermophilen Archaeon Pyrococcus furiosus aus 11 rekombinant hergestellten Untereinheiten in vitro rekonstituiert. Dabei konnte ein aus 9 Untereinheiten bestehendes katalytisch aktives Kernenzym und ein Subkomplex aus den Untereinheiten E´ und F identifiziert werden. Die Untereinheiten E´und F sind homolog zu Rpb7 und Rpb4 der eukaryotischen RNAP II, die dort eine wichtige Funktion bei der Transkriptionsinitiation übernehmen. Mit Hilfe dieses rekombinanten Systems können die Wechselwirkungen und Funktionen einzelner Untereinheiten durch biochemische Untersuchungen und Mutationsstudien analysiert werden. Im Fokus stehen dabei Strukturen im aktiven Zentrum der RNAP, die Kontaktflächen des Kernenzyms mit dem E´-F Subkomplex, sowie die Wechselwirkung der einzelnen Untereinheiten mit dem Transkriptions-Initiationsfaktor TFB.
Die RNA聚合酶(RNAP)RNA聚合酶sowohl mRNA,als auch tRNA和rRNA。 weist jedoch sowohl在ihrerQuartärstrukturals auch den sequenzen ihrer untereinheitengroßeähnlichkeitenzur eukaryotischen rna聚合酶ii aus der der auf auf,weshalb sie einvororzügliches模型transkript kürzlichhaben wir die rnap aus dem dem高温archaeon pyrococcus furiosus aus 11重新组合Hergestellet在体外Rekonstiutuiert。 dabei konnte ein aus 9 untereinheiten bestehendes katalytisch aktives kernenzym und ein subkomplex aus den untereinheiten e´und f sind同源Zu Zu Zu RPB7 rnap II,该系统以新的Transkription Sys的新时代的形式死亡。该系统是重组的,该系统是Untereinheit Durch Biochemische untereschungen,并且该系统未予以安排来分析新系统的分析。 Subkomplex,Sowie Die Wechselwirkung der einzelnen untereinheiten mit dem dem transkriptions-initiationsfaktor tfb。
项目成果
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