内在性カンナビノイドレセプターリガンド(アナンダマイド)の生合成機構に関する研究

点击翻译按钮获取中文摘要

1.脳におけるN-アラキドノイルエタノールアミンの生合成機構 研究代表者らは、これまで、リン脂質に含まれるアラキドン酸などの高度不飽和脂肪酸の代謝回転を詳しく検討してきた。その結果、動物細胞ではリン脂質に含まれる高度不飽和脂肪酸は、トランスアシレーション反応によってリン脂質間を移動していることを明らかにしてきた。今回のN-アラキドノイルエタノールアミンの生合成に関する実験では、これらの成果をふまえ、トランスアシレーション活性がN-アラキドノイルエタノールアミンの生合成に関与しているという仮説を立てて検討を行い、ホスファチジルエタノールアミン(PE)のアミノ基に、ホスファチジルコリン(PC)に含まれているアラキドン酸がCaの存在下、酵素的に転移してN-アラキドノイルPEが生成し、これが更に分解を受けてN-アラキドノイルエタノールアミンを遊離するというルートが存在することを見いだした。2.合成酵素活性の調節機構 前記合成ルートの生理的役割を理解するために、合成酵素活性の調節機構を調べた。これまでの結果から前記ルートではCaが産生調節の鍵を握っているらしいことが分かってきた。必要なCaの濃度はμM程度であり、細胞が活性化されたときにN-アラキドノイルエタノールアミンができてくる可能性がある。3.定量法の確立 N-アラキドノイルエタノールアミンの場合も、できるだけ速く正確・簡便な定量法を確立する必要がある。我々は2次元TLC、蛍光誘導体、逆相HPLCを組み合わせてN-アラキドノイルエタノールアミンを他の分子種から迅速に分離、fmoleレベルの超微量分析に成功した。