内在性カンナビノイドレセプターリガンド(アナンダマイド)の生合成機構に関する研究

内源性大麻素受体配体（anandamide）生物合成机制研究

• 批准号: 08680702
• 负责人: 和久 敬蔵
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680702/
• 关键词: アナンドマイド; トランスアシレーション; N-アラキドノイルエタノールアミン; アラキドン酸

1.脳におけるN-アラキドノイルエタノールアミンの生合成機構 研究代表者らは、これまで、リン脂質に含まれるアラキドン酸などの高度不飽和脂肪酸の代謝回転を詳しく検討してきた。その結果、動物細胞ではリン脂質に含まれる高度不飽和脂肪酸は、トランスアシレーション反応によってリン脂質間を移動していることを明らかにしてきた。今回のN-アラキドノイルエタノールアミンの生合成に関する実験では、これらの成果をふまえ、トランスアシレーション活性がN-アラキドノイルエタノールアミンの生合成に関与しているという仮説を立てて検討を行い、ホスファチジルエタノールアミン(PE)のアミノ基に、ホスファチジルコリン(PC)に含まれているアラキドン酸がCaの存在下、酵素的に転移してN-アラキドノイルPEが生成し、これが更に分解を受けてN-アラキドノイルエタノールアミンを遊離するというルートが存在することを見いだした。2.合成酵素活性の調節機構 前記合成ルートの生理的役割を理解するために、合成酵素活性の調節機構を調べた。これまでの結果から前記ルートではCaが産生調節の鍵を握っているらしいことが分かってきた。必要なCaの濃度はμM程度であり、細胞が活性化されたときにN-アラキドノイルエタノールアミンができてくる可能性がある。3.定量法の確立 N-アラキドノイルエタノールアミンの場合も、できるだけ速く正確・簡便な定量法を確立する必要がある。我々は2次元TLC、蛍光誘導体、逆相HPLCを組み合わせてN-アラキドノイルエタノールアミンを他の分子種から迅速に分離、fmoleレベルの超微量分析に成功した。

1. 脳 に お け る N - ア ラ キ ド ノ イ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン の biosynthesis institutional research representatives ら は, こ れ ま で, リ ン lipid に containing ま れ る ア ラ キ ド ン acid な ど の の highly unsaturated fatty acids metabolism back planning を detailed し く beg し 検 て き た. そ の results, animal cells で は リ ン lipid に containing ま れ る は highly unsaturated fatty acids, ト ラ ン ス ア シ レ ー シ ョ ン anti 応 に よ っ て リ ン を moving between lipid し て い る こ と を Ming ら か に し て き た. Today back to の N - ア ラ キ ド ノ イ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン の biosynthesis に masato す る be 験 で は, こ れ ら の results を ふ ま え, ト ラ ン ス ア シ レ ー シ ョ ン active が N - ア ラ キ ド ノ イ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン の biosynthesis に masato and し て い る と い う 仮 said を て て beg を 検 い, ホ ス フ ァ チ ジ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン (PE) の ア ミ ノ に, ホ ス フ ァ チ ジ ル コ リ ン (PC) contains に ま れ て い る ア ラ キ ド が ン acid and enzyme in the presence of Ca の に planning move し て N - ア ラ キ ド ノ イ ル PE が generated し, こ れ が more に decomposition を け て N - ア ラ キ ド ノ イ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン を free す る と い う ル ー ト が exist す る こ と を see い だ し た. 2. の synthesis enzyme activity before adjusting mechanism synthesis remember ル ー ト の physical battle cut を understand す る た め に, adjusting mechanism for the synthetic enzyme activity の を べ た. こ れ ま で の results か ら before remember ル ー ト で は Ca が produce regulating の key を grip っ て い る ら し い こ と が points か っ て き た. Degree of concentration necessary な Ca の は microns で あ り, cell が activeness さ れ た と き に N - ア ラ キ ド ノ イ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン が で き て く る possibility が あ る. 3. の established quantitative method N - ア ラ キ ド ノ イ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン の も, で き る だ け speed く right, quantitative method is simple な を establish す る necessary が あ る. I 々 は 2 dimensional TLC, 蛍 photoinduced body, reverse phase HPLC を group み わ せ て N - ア ラ キ ド ノ イ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン を he の molecular か ら に separation, quickly fmole レ ベ ル の ultramicro analysis に successful し た.

项目成果

Takayuki Sugiura: "Enzymatic synthesis of anandamide.an endogenous cannabinoid receptor ligand through N-acylphosphatidylethanolamine pathway" Biochem.Bipphys.Res.Commun.218. 113-117 (1996)

Takayuki Sugiura：“通过 N-酰基磷脂酰乙醇胺途径酶促合成 anandamide.an 内源性大麻素受体配体”Biochem.Bipphys.Res.Commun.218。

Takayuki Sugiura: "Transacylase-mediated and phosphodlesterase-mediated synthesis.of N-arachidonoylethanolamine,an endogenous cannabinoid-receptor" Eur.J.Biochem.240. 53-62 (1996)

Takayuki Sugiura：“内源性大麻素受体 N-花生四烯酰乙醇胺的转酰基酶介导和磷酸酯酶介导的合成”Eur.J.Biochem.240。