がん細胞の細胞膜張力を標的とした化合物の探索と治療法への応用

寻找靶向癌细胞细胞膜张力的化合物及其在治疗方法中的应用

• 批准号: 22K19379
• 负责人: 辻田 和也
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19379/
• 关键词: 細胞膜張力; がん; 細胞運動; 細胞膜の張力; がん浸潤・転移

われわれは、細胞膜とアクチン皮層との接着により制御される細胞膜張力が、腫瘍形成や浸潤・転移を抑える「機械的がん抑制因子」として働くという新しいコンセプトを提示した。本研究では、このコンセプトをがん治療に応用すべく、われわれが独自に開発した細胞膜張力の変動を可視化するシステムを用いて、細胞膜張力を上げる作用を持つ化合物をハイスループットスクリーニングにより同定する。そして、同定した化合物が腫瘍形成・転移能を抑制するかを検証し、がん細胞膜の物理特性を標的とした画期的ながん治療薬の候補化合物の提示に挑戦することを目指している。本年度は、モデル細胞として広く使用されている転移性乳がん細胞株であるMDA-MB-231細胞を用い、細胞膜張力とアクチン細胞骨格の変化を可視化するため、GFP-FBP17(細胞膜張力センサータンパク質)とLifeAct-mCherry(アクチン細胞骨格)を安定的に発現する細胞株を樹立した。実際に、細胞膜張力を増加させる作用を持つことが知られている化合物の添加により、GFP-FBP17が細胞膜から外れ細胞質に移行し、細胞膜の伸展構造が抑制され、細胞形態が運動性状態から非運動性細胞様に変化することを確認した。現在、これらの変化を指標にして、蛍光画像を自動取得したハイスループット解析により、化合物ライブラリーを用いて、細胞膜張力を増加させる候補化合物の一次スクリーニングを行っている。

わ れ わ れ は, cell membrane と ア ク チ ン cortex と の then に よ り suppression さ れ る が membrane tension, swollen sores form や infiltration, planning to move を え suppression る "mechanical が ん inhibitory factor" と し て 働 く と い う new し い コ ン セ プ ト を prompt し た. This study で は, こ の コ ン セ プ ト を が ん treatment に 応 with す べ く, わ れ わ れ が に alone open 発 し た membrane tension の - move を visualization す る シ ス テ ム を with い て, cell membrane tension on を げ る role を hold つ compound を ハ イ ス ル ー プ ッ ト ス ク リ ー ニ ン グ に よ り with fixed す る. そ し て, with し た compound が swollen abscess formation, planning to move can suppress す を る か を 検 し, が ん の physical properties を target cell membrane と し た painting period な が ん treatment 薬 の alternate compound の prompt に pick 戦 す る こ と を refers し て い る. This year は, モ デ ル cells と し て hiroo く use さ れ て い る planning moves milk が ん cell lines で あ る を MDA - MB - 231 cells with い, cell membrane tension と ア ク チ ン cells bone の variations change を visualization す る た め, GFP - FBP17 (membrane tension セ ン サ ー タ ン パ ク qualitative) と LifeAct - mCherry (ア ク Youdaoplaceholder0 <s:1> cell grid)を stable に emergent する cell line を establishment た た. Be interstate に, cell membrane tension を raised さ せ る role を hold つ こ と が know ら れ て い る compound の added に よ り, GFP - FBP17 が membrane か ら outside れ cytoplasm に transitional し の stretch, cell membrane structure が inhibit さ れ, cell morphology が motility state か ら non-exercise cells others に variations change す る こ と を confirm し た. Now, こ れ ら の variations change を index に し て, 蛍 light portraits を automatically obtain し た ハ イ ス ル ー プ ッ ト parsing に よ り, compound ラ イ ブ ラ リ ー を with い て, cell membrane tension を raised さ せ る alternate compound の a ス ク リ ー ニ ン グ を line っ て い る.