がん細胞運動とマトリックスメタロプロテアーゼ活性発現の協調的制御機構の解析

癌细胞运动与基质金属蛋白酶活性表达协同调控机制分析

• 批准号: 14770059
• 负责人: 滝野 隆久
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770059/
• 关键词: 細胞外マトリックス; 浸潤; 転移; 細胞運動; MMP; MT-MMP; 情報伝達; 分解酵素; 情報伝達機構

細胞外マトリックス分解と細胞運動の協調的制御が癌の浸潤・転移の成立するに必須である。しかし、その協調的制御機構については未だよくわかっていない。本研究では癌浸潤・転移に重要な役割を担うMT1-MMPの細胞運動における役割を解析した。MT1-MMPを発現しているHT1080細胞をI型コラーゲン上に接着させるとERK活性化、MMP-2活性化、MT1-MMP活性発現、細胞運動が誘導される。MT1-MMP遺伝子導入はコラーゲンにより誘導される細胞運動およびERK活性化を亢進した。MMP阻害剤とMEK阻害剤はコラーゲン上の細胞運動とERK活性化を抑制し、活性型MEK遺伝子導入により誘導される細胞運動とMMP-2の活性化はMMP阻害剤で抑制された。また、MT1-MMPのヘモペキシンドメインの過剰発現はコラーゲン上でのERK活性化、MMP-2活性化、細胞運動を抑制した。以上の結果からI型コラーゲンによるERK活性化とMT1-MMP活性発現誘導間の正のフィードバック機構の存在が考えられた。また、本研究では4回膜貫通型分子CD63がMT1-MMPと結合し、MT1-MMPのリソゾームでの分解を促進することでMT1-MMP活性を負に制御することも報告した。さらに、本研究ではインテグリン/FAK/p130^<cas>による細胞運動誘導情報伝達機構におけるアダプター分子Crkの役割も解析した。CrkIIは221番チロシンがリン酸化されるとSH2ドメインを介して分子内結合し、アダプター分子としての活性を失う。この221番リン酸化チロシンを脱リン酸化酵素の一つPTP1Bが脱リン酸化することが細胞運動亢進に重要であることを証明した。また、221番チロシンが存在しないCrkIIのスプライシング変異体であるCrkIの発現が脳腫瘍組織で亢進しており、細胞におけるCrkI発現がp130^<cas>のリン酸化、Akt活性化を誘導する結果、グリオーマの細胞運動・浸潤能を増強させることも明らかにした。

Extracellular である トリッ ス ス decomposes と cell motility <s:1> coordinated control が cancer <e:1> infiltration · 転 migration <s:1> is established するに must である. し か し, そ の coordinate system of the royal institution に つ い て は not だ よ く わ か っ て い な い. This study で は carcinoma infiltrating planning moving に cut を bear important な service う MT1 MMP - の cell movement に お け る service cut を parsing し た. MT1 MMP - を 発 now し て い る HT1080 cells を type I コ ラ ー ゲ ン on に then さ せ る と ERK activity, MMP - 2 activity, MT1 MMP activity 発 now, cell movement が induced さ れ る. The introduction of the MT1-MMP 伝 subvector into the コラ コラ ゲ ゲ によ によ <e:1> <e:1> <s:1> コラ た コラ コラ コラ コラ コラ コラ を and を によ <e:1> た induces the motility of される cells, the およびERK activation, and the を hyperactivity of <s:1> た. MMP inhibitor against tonic と MEK resistance against tonic は コ ラ ー ゲ ン の on cell movement と ERK activation type を are activated to restrain activity of し, traces of MEK 伝 son import に よ り induced さ れ る cell movement と MMP - 2 の activeness は MMPS inhibitor against tonic で inhibit さ れ た. ま た, MT1 MMP の ヘ モ ペ キ シ ン ド メ イ ン の before turning 発 now は コ ラ ー ゲ ン on で の ERK activity, MMP - 2 activity, cell movement を inhibit し た. の above results か ら type I コ ラ ー ゲ ン に よ る ERK activation と MT1 MMP activity - 発 is induced between の is の フ ィ ー ド バ ッ ク institutions の が exam え ら れ た. ま た, this study で は 4 back transmembrane molecule CD63 が MT1 MMP - と combining し, MT1 MMP の リ ソ ゾ ー ム で の decomposition を promote す る こ と で MT1 MMP activity - を negative に suppression す る こ と も report し た. さ ら に, this study で は イ ン テ グ リ ン / FAK (p130 ^ < cas > に よ る cell movement induction intelligence 伝 for institutions に お け る ア ダ プ タ ー molecular Crk の service cut も parsing し た. CrkII は 221 times チ ロ シ ン が リ ン acidification さ れ る と SH2 ド メ イ ン を interface し て intramolecular し, ア ダ プ タ ー molecular と し て の active を う loss. こ の 221 times リ ン acidification チ ロ シ ン を リ off a つ ン acidification enzyme の PTP1B が リ off ン acidification す る こ と が cell movement hyperthyroidism に important で あ る こ と を prove し た. ま た, 221 times チ ロ シ ン が exist し な い CrkII の ス プ ラ イ シ ン グ - variant で あ る CrkI の 発 now が 脳 swollen sores organization で hyperthyroidism し て お り, cell に お け る CrkI 発 now が p130 ^ < cas > の リ ン acidification, Akt activation induced す を る results, グ リ オ ー マ の cell movement, can infiltrate を raised strong さ せ る Youdaoplaceholder3 と た ら に た た.

项目成果

Takino, T., et al.: "Membrane-type1 matrix metalloproteinase regulates collagen-dependent mitogen-activated protein/extracellular signal-related kinase activation and cell migration."Cancer Research. 64. 1044-1049 (2004)

Takino, T. 等人：“膜 1 型基质金属蛋白酶调节胶原依赖性丝裂原激活蛋白/细胞外信号相关激酶激活和细胞迁移。”癌症研究。

Takino, T., et al.: "Tetraspanin CD63 promotes targeting and lysosomal proteolysis of membrane-type 1 matrix metalloproteinase."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 304. 160-166 (2003)

Takino, T., 等人：“四跨膜蛋白 CD63 促进膜型 1 基质金属蛋白酶的靶向和溶酶体蛋白水解。”Biochem.Biophys.Res.Commun. 304. 160-166 (2003)

Inaki, N., et al.: "Increased matrix metalloproteinase-2 and membrane type 1 matrix metalloproteinase activity and expression in heterotopically transplanted murine tracheas."J. Heart Lung Transplantation. 23. 218-227 (2004)

Inaki, N. 等人：“异位移植的小鼠气管中基质金属蛋白酶 2 和膜型 1 基质金属蛋白酶的活性和表达增加。”

T.Takino, K.Yoshioka, H.Miyamori, K.M.Yamada, H.Sato: "A scaffold protein in the c-Jun N-terminal kinase signaling pathway is associated with focal adhesion kinase and tyrosine-phosphorylated"Oncogene. 21. 6488-6497 (2002)

T.Takino、K.Yoshioka、H.Miyamori、K.M.Yamada、H.Sato：“c-Jun N 末端激酶信号通路中的支架蛋白与粘着斑激酶和酪氨酸磷酸化”癌基因相关。

T.Takino, M.Nakada, H.Miyamori, J.Yamashita, KM.Yamada, H.Sato: "CrkI adaptor protein modulates cell migration and invasion in glioblastoma"Cancer Research. (印刷中). (2003)

T.Takino、M.Nakada、H.Miyamori、J.Yamashita、KM.Yamada、H.Sato：“CrkI 接头蛋白调节胶质母细胞瘤中的细胞迁移和侵袭”癌症研究（2003 年）。