白紋羽病菌のヴァイロコントロールに向けた新規２分節ｄｓＲＮＡの性状解析

用于白斑真菌病毒控制的新型双片段 dsRNA 的表征

• 批准号: 13F03083
• 负责人: 鈴木 信弘
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13F03083/
• 关键词: ヴァイロコントロール; マイコウイルス; dsRNA; メガビルナウイルス; 白紋羽病菌; IRES; 菌類ウイルス; 生物防除; ヴァイロコンロール

白紋羽菌、Rosellinia necatrixは日本の果樹に重大な被害を齎している植物糸状菌病である。本研究では、白紋羽菌に感染し、その病原力を衰退させる新規ウイルス(Rosellinia necatrix megabirnavirus 1, RnMBV1)のウイルス学的性状とヴァイロコントロール（生物防除）因子としての潜在力を調べ、マイコウイルス学、ヴァイロコントールへの貢献を目指し、以下の成果を記述する。1-1ウイルス粒子トランスフェクション法を利用し、菌細胞質不和合性の複数の白紋羽病菌への感染性ならびに病原力低下効果を確認した。1-2 RnMBV1を目が異なるクリ胴枯病菌への感染性ならびに病原力低下効果を確認した。RnMBV1のヴァイロコントロール因子としての可能性を広げる成果である(JAMAL氏が来日する以前に前倒しで実施し、論文掲載にこぎ着けた)。1-3ヴァイロコントロール因子の長期安定保存が不可欠であるが、精製RnMBV1粒子は -80Cで１年以上安定に感染性を保持していた。 　　　　　　　2-1 RnMBV1ゲノムセグメントはそれぞれ極めて長い(約1.6 kb)の非翻訳領域（ミニシストロンを複数含む）と２つのORFをもつ。5’側ORFがどのような機構で完全長mRNAから翻訳されるかを、リポーター系を確立した。2-2 5’非翻訳領域がIRES（内部リボゾームエントリー部位）活性を持つことを確認し、さらにそのコア活性領域をORF1領域近傍の５００塩基の絞り込みに成功した。2-3感染性RnMBV1核酸の合成を試みたが、成功には至らなかった。

White stripe fungus, Rosellinia necatrix and Japanese fruit trees are seriously damaged. In this study, the contribution of the new regulation on infection and pathogenicity decline of Rosellinia necatrix megavirnavirus 1 (RnMBV1) to its biological characteristics, biological control factors and potential regulation, biological control and pathogenicity is described. The following results are described. 1-1 Identification of low pathogenicity and infectivity of multiple white streak pathogens by using the particle size analysis method 1-2 RnMBV1 is a highly infectious pathogen and has low pathogenicity. RnMBV1's "open source" factor and the possibility of its development are discussed in this paper. The stability of 1-3 RnMBV1 particles can be maintained for more than 1 year at-80C. 2-1 RnMBV1 has a set of ORFs with a length of about 1.6 kb and a non-inverted domain (including multiple ORFs) and 2 ORFs. 5 'side ORF is completely long mRNA, and the structure is completely long mRNA. 2-2 5 'non-inverted domain IRES (internal display site) activity is confirmed, and the active domain ORF1 is close to the 500-base active domain. 2-3 The synthesis of infectious RnMBV1 nucleic acid was successful.

项目成果

白紋羽病菌の潜在的ヴァイロコントロール因子がクリ胴枯病菌でも効果あり。

白冠真菌的潜在病毒控制因子也能有效对抗板栗枯萎病真菌。