Funktionelle Charakterisierung von CRP2 und seine Bedeutung für die NO/cGMP-Signalkaskade

NO/cGMP/cGMP-激酶信号通路是一种具有生物学功能的调节机制。cGMP-激酶的活性使胃肠道、胃肠道和支气管系统的粘膜松弛，影响神经传递并调节血栓形成和内皮细胞的功能。观察NO/cGMP-信号通路对这一功能的影响，发现cGMP-激酶的分子机制还不清楚。我们需要一种新的cGMP-激酶底物来进行鉴定。半胱氨酸蛋白2（CRP 2）是一种通过cGMP激酶磷酸化而特异性表达的蛋白质，它可以通过cGMP激酶的磷酸化作用来检测肠粘膜和肠神经。本项目旨在原位检测CRP 2的cGMP磷酸化水平，并通过双杂交筛选韦尔登进行蛋白质间的相互作用。在CRP 2的生物学作用方面，我们认为这是cGMP-激酶的新替代品，它具有结构性和条件性，并可用于临床。通过对CRP 2在肠粘膜中的表达及神经传递的分析，证实了CRP 2的存在。Weiterhin韦尔登和其他glattmuskuläre Gewebe（Gefäße，支气管系统）auf Funktionsdefizite untersucht。但是CRP 2和cCMP-验证的作用增强了韦尔登的作用。

Die NO/cGMP/cGMP-Kinase-Signalkaskade ist wesentlich an der Regulation wichtiger biologischer Funktionen beteiligt. Die Aktivierung der cGMP-Kinase relaxiert die glatte Muskulatur von Gastrointestinaltrakt, Gefäßen und Bronchialsystem, beeinflußt die Neurotransmission und reguliert die Funktion von Thrombozyten und endokrinen Zellen. Obwohl die Bedeutung des NO/cGMP-Signalweges für diese Funktionen in letzter Zeit eindeutig gezeigt werden konnte, sind die molekularen Mechanismen distal der cGMP-Kinase noch weitgehend unklar. Wir haben kürzlich ein neues Substrat der cGMP-Kinase im Dünndarm identifiziert. Es handelt sich dabei um das Cystein-reiche Protein 2 (CRP2), das spezifisch durch cGMP-Kinase phosphoryliert wird und in bestimmten Muskelschichten und Neuronen des Intestinums mit der cGMP-Kinase kolokalisiert ist. Im Rahmen des Projekts soll die cGMP-abhängige Phosphorylierung von CRP2 in situ nachgewiesen und mögliche interagierende Proteine mittels eines Zwei-Hybrid-Screen identifiziert werden. Da über die biologische Rolle von CRP2 bisher sehr wenig bekannt ist, wollen wir dieses neue Subtrat der cGMP-Kinase konstitutiv und konditionell deletieren und entsprechende Mauslinien etablieren. Anschließend wird an CRP2-defizienten Tieren die Funktion der glatten Muskulatur im Intestinum und die enterische Neurotransmission analysiert. Weiterhin werden andere glattmuskuläre Gewebe (Gefäße, Bronchialsystem) auf Funktionsdefizite untersucht. Damit soll die zelluläre Bedeutung von CRP2 und seine Rolle bei cCMP-vermittelten Effekten aufgeklärt werden.