Charakterisierung des ADP-ribosylierenden Bacillus sphaericus Toxins MTX

球形芽孢杆菌产生97KDA ADP-核糖核酸毒素(MTX)，为本征型。在S的酶毒素和酶病变学研究中，Von beonderem药物学和毒理学兴趣和Insekten中的Weil es sowohl是一种毒素。DAS毒素具有蛋白水解性，N-末端约27kda，C-末端约70kda片段。DAS 27 kDa片段与腺苷二磷酸核糖基转移酶结合，并在体外修饰Zahlreiche Proteine im Zytosol von Insekten和Säugetierzellen。DAS 70KDA碎片是Zellbindung和Die Aufnahme des oxins in die Zelle verantwortlich中的Whrscheinlich für die Zellbindung and die Aufnahme des oxins。在DEM volliegenden Antrag soll die Enzymaktivität des毒素生化特性和真核细胞底物的ADP-核糖基转移酶鉴定。Das Aus der katalytischen Domäne der ADP核糖基转移酶von B.sphaericus和DEM ZellTransportsystem von Clostridium botulum C2毒素。MIT Hilfe des ZellTransport Systems Sollen die zytotoxischen and zellulären Wirkungen von MTX in verschiedenen Zelltyen(Insektenzellen and Säugetierzellen)untersuthht ht to zytotoxischen and zellulären Wirkungen von MTX in verschiedenen Zelltyen(Insektenzellen And Zellgetierzellen)untersuht ht.球状杆菌毒素约70 kDa Bindungs-and Transportdomäne，De zu einer Inhibiton der Enzymaktivität füHRT，Charakterisiert Widden。

Bacillus sphaericus produziert ein 97 kDA ADP-ribosylierendes Toxin (MTX), das moskitozidale Eigenschaften hat. Das Toxin ist von besonderem pharmakologischem und toxikologischem Interesse, weil es sowohl in Insekten- als auch in Säugetierzellen zytotoxische und zytopathische Eigenschaften hat. Das Toxin wird proteolytisch aktiviert, wobei ein N-terminales ~27 kDA und ein C-terminales ~70 kDA Fragment entstehen. Das 27 kDa Fragment besitzt ADP-Ribosyltransferase-Aktivität und modifiziert in vitro zahlreiche Proteine im Zytosol von Insekten- und Säugetierzellen. Das 70 kDA Fragment ist wahrscheinlich für die Zellbindung und die Aufnahme des Toxins in die Zelle verantwortlich. In dem vorliegenden Antrag soll die Enzymaktivität des Toxins biochemisch charakterisiert und die eukaryonten Zielsubstrate der bakteriellen ADP-Ribosyltransferase identifiziert werden. Es wird ein Fusionstoxin konstruiert, das aus der katalytischen Domäne der ADP-Ribosyltransferase von B. sphaericus und dem Zelltransportsystem von Clostridium botulinum C2 Toxin besteht. Mit Hilfe des Zelltransportsystems sollen die zytotoxischen und zellulären Wirkungen von MTX in verschiedenen Zelltypen (Insektenzellen und Säugetierzellen) untersucht werden. Schließlich soll die Interaktion der 27 kDA Enzymdomäne des B. sphaericus Toxins mit der putativen 70 kDa Bindungs- und Transportdomäne, die zu einer Inhibiton der Enzymaktivität führt, charakterisiert werden.