Analyse von Expressionsmuster und Funktion der neu identifizierten MIA-homologen Proteine MIA-2 und TANGO

在Zellkultursystemen中的体外Sowohl也可以在胚胎和成人的体内Skelettsystem中表达蛋白质MIA/CD-RAP（“黑素瘤抑制活性”bzw.“软骨衍生的视黄酸敏感蛋白”）（Bosserhoff等人，1997年）。MIA表达的诱导主要是通过转录调控机制实现的，但这与蛋白质的功能不同。在人类基因组全序列测定中，发现了MIA-同源OTOR（MIAL，FPD）、两个同源DNA-测序（MIA-2，TANGO）的韦尔登。通过对蛋白质表达的分析，我们可以确定蛋白质的表达水平是韦尔登的主要分析指标。通过韦尔登的方法，研究了MIA-2和TANGO蛋白在体内的功能。从MIA Knock-out Mäusen的数据可以看出，MIA -/- Mäuse结构的基质结构与原纤结构一样。敲除-Mäuse的Dallas Kreuzungen können mögliche Verluste eines Phänotyps durch Redundanz untersucht韦尔登.通过韦尔登的体外和体内分析，发现MIA-2和TANGO的联合应用对软骨增殖和分化有明显的影响，并通过韦尔登细胞的观察，发现MIA-2和TANGO的联合应用对软骨的分化有明显的影响。

Sowohl in vitro in Zellkultursystemen als auch in vivo im embryonalen und adulten Skelettsystem korreliert die Expression des Proteins MIA/CD-RAP ("melanoma inhibitory activity" bzw. "cartilage-derived retinoic acid sensitive protein") sehr eng mit der Ausdifferenzierung von Chondrozyten (Bosserhoff et al., 1997). Die Induktion der MIA-Expression erfolgt dabei auf der Ebene transkriptioneller Regulationsmechanismen, wobei diese, wie auch die Funktion des Proteins, bislang nicht geklärt sind. Nach der kompletten Sequenzierung des humanen Genoms konnten, neben dem bereits bekannten MIA-Homolog OTOR (MIAL, FPD), zwei weitere homologe DNA-Sequenzen (MIA-2, TANGO) identifiziert werden. Im Rahmen des hier beantragten Projektes soll zunächst das Expressionsmuster dieser beiden putativen Proteine genauer analysiert werden. Im zweiten Projektteil sollen nähere Aufschlüsse über die Funktion der beiden Proteine MIA-2 und TANGO in vivo durch die Herstellung von Knock-out-Mäusen gewonnen werden. Präliminäre Daten aus MIA Knock-out Mäusen belegen, dass die Matrixstruktur der MIA -/- Mäuse strukturelle Veränderungen wie verdickte Fibrillen aufweist. Durch Kreuzungen der Knockout-Mäuse können mögliche Verluste eines Phänotyps durch Redundanz untersucht werden. Ferner sollen funktionelle Aspekte von rekombinanten MIA-2 und TANGO auf Proliferation und Differenzierung von Chondrozyten in vitro und in vivo analysiert werden, nachdem von uns gezeigt werden konnte, dass MIA die Differenzierung von Chondrozyten beeinflusst.