Die Rolle von Proteinkinase C alpha in der Pathogenese der diabetischen Nephropathie

我们已经在实验室中找到了这些假说，但是通过蛋白激酶C的特异性同工酶，我们发现了高血糖症的细胞内纤维。我们知道，通过蛋白激酶C检测内皮细胞的通透性是非常重要的。接下来我们将介绍蛋白激酶C用于转化生长因子B的葡萄糖诱导表达。在Tiermodell中，我们在高血糖大鼠中表达蛋白激酶C α。在基础研究中，我们必须了解蛋白激酶C在糖尿病肾病诊断中的作用，并进行假设性试验，以确定其活性。PKC亚型的表达可促进基质的发育，促进肾间质的发育。主要有以下几种方法：1）链脲佐菌素诱导肾硬化的反义寡核苷酸静脉注射法。2)一个带有bzw结构的转基因鼠。在Gefäßendothel中诱导表达PKC。3)在蛋白激酶C a，B und e的敲除模型中诱导链脲佐菌素诱导物高血糖。4)蛋白激酶C异构体的绿色荧光蛋白突变体在葡萄糖暴露后PKC异构体细胞内转移的研究。这种韦尔登是通过一种新的转基因模型来研究蛋白激酶C在高血糖下的作用。因此，我们需要研究代谢途径、蛋白激酶C的激活、鉴定，并利用反义技术新疗法来治疗糖尿病诱导的肾硬化。

Wir haben im letzten Antragszeitraum die Hypothese untersucht, daß die intrazelluläre Wirkung von Hyperglykämie durch spezifische Isoformen der Proteinkinase C vermittelt wird. Wir konnten zeigen, daß die glukoseinduzierte Zunahme der endothelialen Permeabilität durch Proteinkinase C a vermittelt wird. Weiterhin konnten wir nachweisen, daß Proteinkinase C a für die glukoseinduzierte Expression von Transforming-Growth-Factor b entscheidend ist. Im Tiermodell fanden wir in den Gefäßen von hyperglykämischen Ratten eine gesteigerte Expression von Proteinkinase C a. Auf der Grundlage dieser Befunde wollen wir nun im folgenden Antragszeitraum die Rolle der Proteinkinase C a bei der Entstehung der diabetischen Nephropathie weiter untersuchen und die Hypothese testen, daß die Aktivierung bzw. die gesteigerte Expression dieser PKC Isoform für die gesteigerte Matrixbildung und für die Entstehung der Nephrosklerose von zentraler Bedeutung ist. Es sind folgende Versuchsansätze geplant: 1) Intravenöse Verabreichung von Antisense-Oligonukleotiden bei der streptozotocininduzierten Nephrosklerose. 2) Herstellung einer transgenen Ratte mit konstitutiver bzw. induzierbarer Überexpression PKC a im Gefäßendothel. 3) Induktion von streptozotocininduzierter Hyperglykämie in Knock-Out-Mäusen von Proteinkinase C a, b und e. 4) Verwendung von Green-Fluorescent-Protein-Mutanten der Proteinkinase C Isoformen zur Untersuchung der intrazellulären Translokation der PKC Isoformen nach Glukoseexposition. Diese Untersuchungen werden durch die Verwendung transgener Tiermodelle einen eindeutigen Nachweis der Rolle von Proteinkinase C a unter den Bedingungen der Hyperglykämie liefern. Außerdem werden die metabolischen Zwischenschritte, die zur Aktivierung der Proteinkinase C führen, identifiziert werden, und es werden mit Hilfe der AntisenseTechnologie neue therapeutische Ansätze zur Beeinflussung der diabetesinduzierten Nephrosklerose zur Verfügung stehen.