Entwicklungspotenzial, epigenetischer Status, Proteomprofil und Gesundheit von Mammalieroozyten und Embryonen aus Cryopreservierung und verbesserter und mehrstufiger Follikelkultur

Die Gruppe konnte im letzten Förderungszeitraum erfolgreich Entwicklung，chromosomale und epigenetische Constitution und Proteom von in vitro gewachsenen und gereiften Eizellen aus muriner präantraler Follikelzellkultur nach Vitrifikation untersuchen; Kultur und Cryokonservierung von gespendem humanen Material aus Ovar wurden verbessert.在新的Förderperiode soll文化在实验模型的Maus（比勒费尔德）和在gespendeten humanen和异种移植humanem Gewebe（吕贝克）weiter optimiert韦尔登durch Einbetten在Fienium/Alginate矩阵和Mehrschrittkultur与frischen和vitrifizierten Follikeln。体外受精卵和胚胎可在Hinblick进行氧化还原和发育（比勒费尔德），基因表达和表观基因组（维尔茨堡）和蛋白质组（慕尼黑）分析韦尔登。玻璃化作用对活的Oozyten和Embryonen的氧化还原状态的影响，影响了韦尔登（比勒费尔德）的表达。在Eizellen和Embryonen中基因顺式调节区域的甲基化检测，以及ICM和滋养层外胚层的非特异性活检（jeweils 5 or weniger Zellen）中的表达检测中，将采用新的“有限稀释”（LD）检测方法，在印迹检测中使用Erhalt和Mosacismus;基因表达将使用RT-PCR检测（维尔茨堡）。牛卵泡、卵和胚胎的蛋白质。采用体外同步检测法和灵敏度最优化的纳米LCMS/ MS法和稳定同位素标记技术，可用于韦尔登和定性鉴别。该项目旨在对辅助生殖技术中的生育和安全方法进行研究。

Die Gruppe konnte im letzten Förderungszeitraum erfolgreich Entwicklung, chromosomale und epigenetische Konstitution und Proteom von in vitro gewachsenen und gereiften Eizellen aus muriner präantraler Follikelzellkultur nach Vitrifikation untersuchen; Kultur und Cryokonservierung von gespendetem humanen Material aus Ovar wurden verbessert. In der nächsten Förderperiode soll die Kultur im experimentellen Modelle der Maus (Bielefeld) und in gespendeten humanen und xeno-transplantierten humanem Gewebe (Lübeck) weiter optimiert werden durch Einbetten in Fibrin/Alginate Matrix und Mehrschrittkultur mit frischen und vitrifizierten Follikeln. Oozyten und Embryonen aus IVF sollen im Hinblick auf den Redoxzustand und Entwicklung (Bielefeld), Genexpression und Epigenom (Würzburg) und Proteom (München) analysiert werden. Einfluss von Vitrifikation auf den mitochondrialen Redoxstatus soll an lebenden Oozyten und Embryonen mittels Expression von mitochondrialem Grx1-roGFP2 bestimmt werden (Bielefeld). Um das Methylierungsmuster von cis-regulatorischen Regionen von geprägten Genen in Eizellen und Embryonen, und das Expressionsmuster in unterschiedlichen Biopsien (jeweils 5 oder weniger Zellen) der ICM und des Trophectoderms zu bestimmen, wird der neue 'limiting dilution' (LD) Assay eingesetzt, um den Erhalt und Mosacismus der Imprintmuster festzustellen; Genexpression wird mittels RT-PCR untersucht (Würzburg). Das Proteom von ganzen Follikeln, Oozyten und Embryonen aus Maus bzw. mit menschlichem Ursprung und von synchron sich in vitro entwickelnden Follikeln, soll mit Hilfe sensitiver optimierter nano-LCMS/ MS und stabilen Isotopen Markierungstechniken untersucht werden, um Stadien- und Qualitätsmarker zu identifizieren. Das Projekt zielt auf eine Verbesserung der Methoden zum Fertilitätserhalt und der Sicherheit in Assistierter Reproduktionstechnik.