Identification of novel tissue-specific stem and progenitor cells responding to Wnt signaling

鉴定响应 Wnt 信号传导的新型组织特异性干细胞和祖细胞

• 批准号: 21H04797
• 负责人: 菊池 章
• 金额: $ 27.87万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-05 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H04797/
• 关键词: Wntシグナル; 組織幹細胞; 腺組織; 扁平上皮組織; AQP3; 唾液腺; 腺細胞; 扁平上皮; 食道; ジフテリア毒素; CXCR2; Wnt; CKAP4; Arl4c; 細胞生物学

令和3年度に作製したAQP3-CreERT(AQP3の開始コドン直下にCre-ERT2を挿入した改変マウス);Rosa-STOP-YFPマウスを用いて、AQP3陽性細胞の系統追跡解析(Lineage tracing analysis)を行った。唾液腺においては、生理的にはYFP陽性細胞の発現を認めなかったが、導管結紮後の傷害唾液腺組織においては導管部にYFP陽性細胞が出現した。その後、結紮解除後3週間の組織修復時においては、唾液腺全体にYFP陽性細胞(AQP3陽性細胞の子孫細胞)が確認された。この結果から、導管結紮後の唾液腺障害からの修復過程にAQP3陽性細胞が関与することが明らかになった。生理的(非傷害時)にAQP3が発現する食道上皮においては、タモキシフェン投与直後にはYFP陽性細胞が基底層近傍に認められ、投与60日後には重層扁平上皮の表層までYFP陽性細胞が拡大した。この結果から、食道上皮においてAQP3陽性細胞が恒常的な重層扁平上皮の維持に関与している可能性が示唆された。一方、AQP3陽性細胞を除去する目的で、AQP3-2A-CreERT2(AQP3の終止コドン直下にT2Aを介してCreERT2を挿入した改変マウス);Rosa-STOP-DTRマウスを新たに作製した。AQP3-2A-CreERT2マウスはCreERT2の発現量がAQP3-CreERT2マウスよりも高く、細胞除去解析に有用である可能性が示唆された。実際、AQP3-2A-CreERT2;Rosa-STOP-DTRマウスの食道からオルガノイドを作製し、DT（ジフテリア毒素）を投与したところ、AQP3陽性細胞が除去されることが確認された。本改変マウスを用いて、生体内でAQP3陽性細胞を除去し、唾液腺の修復や食道上皮の維持に与える影響を検討している。

In order to control AQP3-CreERT(AQP3 start point, Cre-ERT2 start point), Rosa-STOP-YFP start point, AQP3-positive cells line tracing analysis was performed. YFP positive cells appeared in salivary gland tissue after ligation of duct. YFP positive cells (AQP3 positive cells and their descendants) were identified in all salivary glands during tissue repair at 3 weeks after ligation. The results showed that AQP3 positive cells were associated with salivary gland damage after duct ligation. In physiological (non-injury) condition, AQP3 was found in esophageal epithelium, and YFP positive cells were found near basal layer, and YFP positive cells were found in surface layer of stratified squamous epithelium after 60 days of administration. These results suggest that AQP3 positive cells in the esophageal epithelium may be associated with the maintenance of stratified squamous epithelium. In addition, AQP3-positive cells were removed for the following purposes: AQP3 -2A-CreERT 2;Rosa-STOP-DTR. AQP3 -2A-CreERT 2 is not available for CreERT2 detection. AQP3-CreERT2 is not available for cell removal. In fact, AQP3 -2A-CreERT2;Rosa-STOP-DTR can be used to control and detect AQP3-positive cells. The effect of AQP3-positive cells in vivo, salivary gland repair and esophageal epithelium maintenance were studied.

项目成果

Wnt5a regulates cellular state of specific subtype of fibroblast and accelerates tumor progression.

Wnt5a 调节成纤维细胞特定亚型的细胞状态并加速肿瘤进展。

• 发表时间: 2022
• 作者: Harada A;Harada T;Yasumizu Y;Kikuchi A.
• 通讯作者: Kikuchi A.

Wntシグナル研究を基盤とした新規抗がん剤開発への挑戦

基于Wnt信号研究开发新抗癌药物的挑战

• 发表时间: 2022
• 作者: Hiroko Nishikawa;Priscillia Christiany;Takeru Hayashi;Hisashi Iizasa;Hironori Yoshiyama;Masanori Hatakeyama;井上飛鳥;菊池 章
• 通讯作者: 菊池 章

AOM/DSS大腸がんマウスモデルにおけるWnt5a発現線維芽細胞サブセットの同定

AOM/DSS 结肠癌小鼠模型中表达 Wnt5a 的成纤维细胞亚群的鉴定

• 发表时间: 2021
• 作者: 原田武志;原田昭和;香山尚子;佐藤朗;菊池章
• 通讯作者: 菊池章

GREB1 drives HNF4α-dependent oncogenic transcription and tumor growth in Wnt signal-activated hepatocellular carcinoma.

GREB1 在 Wnt 信号激活的肝细胞癌中驱动 HNF4α 依赖性致癌转录和肿瘤生长。

• 发表时间: 2022
• 作者: Matsumoto S;Harada A;Kikuchi A.
• 通讯作者: Kikuchi A.

大阪大学大学院 医学系研究科 分子病態生化学

大阪大学大学院医学研究科，分子病理生物化学