Wnt5aシグナルネットワークの異常によるがんと炎症の悪性化の分子機構の解明

阐明Wnt5a信号网络异常导致癌症和炎症恶变的分子机制

基本信息

批准号：
16H02469
负责人：
菊池章
金额：
$ 29.37万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-01 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16H02469/
关键词：
Wnt5a がん炎症

项目摘要

私共は、β-カテニン非依存性経路を活性化する代表的リガンドであるWnt5aに着目して、Wnt5aタンパク質を精製し、その翻訳後修飾の意義を明らかにするとともに、Wnt5aによる細胞内シグナル経路の活性化機構も解明してきた。免疫組織学的解析により、Wnt5aの発現は癌の悪性度や予後不良に相関することも明らかにした。また、抗Wnt5aポリクローナル抗体とモノクローナル抗体を作製して、これらの抗体が胃癌細胞の転移能を抑制することをin vivo転移モデル実験において示した。さらに、私共はWnt5aとその受容体Ror2のコンディショナルノックアウト(cKO)マウスを作製し、本cKOマウスをデキストラン硫酸ナトリウム（DSS）誘導性腸管炎症モデルに用いて、Wnt5aシグナルと炎症との関係を解析した。その結果、潰瘍部の腸管間質領域において線維芽細胞から分泌されたWnt5aが、Ror2を発現している樹状細胞（DC）からのインターロイキン(IL-12)の分泌を促進し、ナイーブT細胞からTh1細胞への分化を増強する結果、腸管炎症病態の増悪化に関与することを明らかにした。本研究ではこれまでの研究成果を基盤にして、炎症を背景とした発がんにおけるWnt5a発現の意義を明らかにする。さらに、Wnt5aシグナルを阻害することにより、がんと炎症を同時に抑制できる化合物探索のためのスクリーニング系の開発も行う。私共の研究室には、これまでに築き上げてきたWnt5aに関する種々のアッセイ系が完備されており、それらを用いることにより、Wnt5aシグナルの異常によるがんと炎症の悪性化の分子機構の全貌を理解するための研究が可能である。4月から本研究を開始したが、基盤Sが採択されたため、基盤Aにおける本研究計画を廃止した。基盤Sにおいて、新たな研究計画とともに本研究計画を引き続き行うこととなった。

我们专注于Wnt5a，这是一种激活β-catenin独立途径的代表性配体，并纯化了Wnt5a蛋白，阐明了其翻译后修饰的重要性，并阐明了Wnt5a通过这些机制激活细胞内信号传导途径。免疫组织学分析还表明，WNT5A表达与癌症恶性肿瘤和预后不良相关。此外，制备了抗Wnt5a多克隆抗体和单克隆抗体，并在体内转移模型实验中，证明这些抗体抑制了胃癌细胞的转移性潜力。此外，我们生成了Wnt5a及其受体ROR2的条件敲除（CKO）小鼠，并在硫酸葡萄糖钠（DSS）模型中使用了该CKO小鼠，从而分析了Wnt5a信号和炎症之间的关系。结果，据揭示了Wnt5a从溃疡的肠道基质区域的成纤维细胞分泌，促进了表达ROR2的树突状细胞（DCS）的白介素（IL-12）的分泌，并增强了从天真T细胞到TH1细胞的区别，导致肠道炎症病的膨胀病。基于先前的研究结果，本研究将阐明Wnt5a表达在癌变中与炎症背景的重要性。此外，我们将开发一个筛选系统，用于寻找可以通过抑制WNT5A信号同时抑制癌症和炎症的化合物。我们的实验室配有各种WNT5A测定系统，我们已经构建了最新的，并且通过使用这些系统，可以研究由于异常WNT5A信号传导而导致的癌症和炎症恶性肿瘤的完整分子机制。这项研究始于4月，但由于采用了基础，该基金会A的研究计划被废除了。该研究计划将继续与Basic S的新研究计划一起执行。