Axinを介入するβ-cateninの分解機構の解析

介导Axin的β-catenin降解机制分析

• 批准号: 10878107
• 负责人: 菊池 章
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10878107/
• 关键词: Axin; β-catenin; Wntシグナル伝達; Tcf; SW480細胞

AxinはWntシグナル伝達系抑制因子として同定されたが、その作用機構は不明であった。本研究ではAxinのWntシグナル伝達系における役割を解析した。SW480細胞はAPCのC端側半分が欠損しているために、β-cateninが分解されずに細胞質に蓄積している。このSW480細胞にAxinを発現させるとβ-cateninが著しく減少した。また、COS細胞にAxinを発現させるとパルスラベルされたβ-cateninの半減期が短縮した。したがって、Axinがβ-cateninの分解を促進することは決定的である。Axinのdeletion mutantsをSW480細胞に発現させるとN端側300個のアミノ酸を除去した場合はAxinのβ-catenin分解能には変化が無かったが、C端側100個のアミノ酸を除去するとAxinのβ-catenin分解能は消失した。この部位にはDIXドメインが含まれているので、DIXドメインはAxinの機能に重要であると考えられた。Wntシグナルがβ-cateninの安定化を促進することはよく知られている。そこで、AxinのWntシグナル依存性のβ-catenin蓄積に対する影響を調べるために、L細胞にAxinを恒常的に発現させた細胞株を樹立した。本細胞株にWnt-3aを作用させてもβ-cateninの蓄積は観察されなかった。転写因子のTcf-4はβ-cateninにより活性化される。野生型のL細胞ではWnt-3aはTcf-4を活性化したが、Axinを発現させたL細胞では活性化されなかった。これらの結果から、AxinはWnt依存性のβ-cateninの蓄積とTcfの活性化を抑制することにより、Wntシグナル伝達系を制御すると考えられた。

Axin Wnt In this study, we analyzed the relationship between Axin and Wnt. SW480 cells are deficient in APC and β-catenin is decomposed and accumulated in cytoplasm. The expression of β-catenin in SW480 cells decreased. The half-life of β-catenin was shortened after COS cell Axin development. Axin and β-catenin decomposition Axin deletion mutants were detected in SW480 cells, and 300 of them were removed from the N-terminal side. This part of the DIX is important for the function of the Axin. Wnt is the best way to stabilize β-catenin. The effects of Axin and Wnt on β-catenin accumulation were modulated, and L cells were established. Wnt-3a acts as an inhibitor of β-catenin accumulation in this cell line. Tcf-4 is a β-catenin that is activated. Wild-type L cells are activated by Wnt-3a and Tcf-4, and by Axin. The results show that Axin is Wnt dependent on β-catenin accumulation and Tcf activation inhibition.

项目成果

Kishida,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,directly interacts with adenomatous polyposis coli and regulates the stabilization of β-catenin." J.Biol.Chem.273・18. 10823-10826 (1998)

Kishida, S.：“Axin 是 Wnt 信号通路的负调节因子，直接与腺瘤性息肉病大肠杆菌相互作用并调节 β-catenin 的稳定性。”J.Biol.Chem.273·18 (1998)。

Ikeda,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,forms a complex with GSK-3β and β-catenin and promotes GSK-3β-dependent phosphorylation of β-catenin." EMBO J.17・5. 1371-1384 (1998)

Ikeda, S.：“Axin 是 Wnt 信号通路的负调节因子，与 GSK-3β 和 β-catenin 形成复合物，并促进 EMBO J.17・5 的 GSK-3β 依赖性磷酸化。” -1384 (1998)