歯肉増殖症や肥満に関わる新規分子SPOCK1のシグナリング経路の探索

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これまでに申請者らは、歯肉増殖症においてSPOCK1が上皮間葉転換（EMT）に関与することでその病因に関与すること、更に SPOCK1 が脂肪細胞の成熟を促して脂肪組織の肥大化に関わる可能性があることを報告した。しかし、上皮や脂肪細胞におけるSPOCK1の特異的受容体やそのシグナル伝達経路などの詳細は不明であるため、解析の計画を立案し実施した。プロテオミクス解析実施の条件決定のため、4種類の分化段階（未分化時、分化誘導時、分化維持時、分化完了時）のマウス前区脂肪細胞株もしくは分化3T3-L1細胞にSPOCK1（100 ng/mL）を24 h刺激し、それぞれRNAサンプルを回収し、遺伝子発現を検討した。発現を検討する遺伝は、先行研究およびデータベース（STRING）を用いた解析によSlug、Snail、C/ebpβ、Mmp2、Mmp9の５つの遺伝子とした。未分化時、分化維持時にSPOCK1刺激をしたサンプルでは、未刺激サンプルと比較し、検討したどの遺伝子についても有意な遺伝子発現変動は無かった。一方、分化誘導時の3T3-L1細胞にSPOCK1刺激をしたサンプルでは、未刺激サンプルと比較し、複数の遺伝子について、有意に発現が亢進した。以上より、SPOCK1は分化誘導時に3T3-L1細胞に発現するレセプターに結合し、それに続くシグナルを活性化する可能性が示唆された。この結果をもとに同細胞の分化誘導時のSPOCK1刺激有無のサンプルで、プロテオミクス解析を実施した。今回の解析ではSPOCK1刺激有無で約５０種類のタンパ発現に変動が認められた。