抗アレルギー活性を有するIgE標的デコイリポソーム製剤の開発

具有抗过敏活性的 IgE 靶向诱饵脂质体制剂的开发

• 批准号: 20K06996
• 负责人: 田所 哲
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kanagawa Prefectural Institute of Public Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K06996/
• 关键词: リポソーム; アレルギー; マスト細胞

花粉症や喘息などの即時型アレルギー疾患は増加傾向にあり、社会問題として取り上げれる機会が増えている。アレルギー疾患に関与するマスト細胞は、細胞内に炎症性メディエーターを含む分泌顆粒がある。抗原が細胞膜表面上のIgEを介してIgE受容体を架橋すると、外液から細胞内へのCa2+流入に続く、脱顆粒によって炎症性メディエーターが細胞外に放出され、アレルギー症状が引き起こされることになる。本研究では、IgE受容体α鎖をリポソームに組み込むことでプロテオリポソームとし、その抗アレルギー活性を検討することを目的とした。リポソームは静置水和法を用いて作製した。IgE受容体α鎖は、リポソーム共存下においてin vitroのタンパク質合成系を用いて作製した。IgE受容体α鎖の発現は、抗体を用いたウエスタンブロット及び免疫染色で確認した。作製したプロテオリポソームにおけるIgE受容体α鎖の配向性は、トリプシン処理により評価した。マスト細胞の脱顆粒は、分泌顆粒中に含まれるbeta-hexosaminidaseの放出量を指標に評価した。IgE受容体α鎖リポソームによる細胞傷害性は、細胞外に放出されたLDHを指標に評価した。ウエスタンブロット及び免疫染色の結果、IgE受容体α鎖が組み込まれたプロテオリポソームを構築することができた。構築したIgE受容体α鎖リポソームの配向性について検討したところ、内向きと外向きでランダムに組み込まれていた。また、IgE受容体α鎖リポソームは、マスト細胞に対して細胞傷害性を示さず、抗原刺激による脱顆粒を抑制した。しかしながら、抑制効果は小さいことから、IgEがリポソームに吸着し、マスト細胞表面のIgEが減少した可能性も考えられる。

Pollinosis, wheezing, and instant disease tend to increase, and social problems tend to increase. The disease is related to cellular inflammation. Antigen is mediated by IgE receptor on cell membrane, and the extracellular Ca2 + influx from external fluid, degranulation, inflammation, extracellular release, and symptom initiation. This study aims to investigate the activity of IgE receptor α-lock in the brain. The water and the method of standing still are used to control it. IgE receptor alpha lock, complex blue shift in vitro and complex synthesis system IgE receptor alpha lock detection, antibody detection and immunostaining The alignment of IgE receptor α-locks and the treatment of IgE receptors are evaluated. Evaluation of the release of beta-hexosaminase in degranulation and secretion granules IgE receptor α-lock, cellular toxicity, extracellular release, LDH index The results of immunostaining, IgE receptor alpha lock, and the structure of the system. The structure of IgE receptor α-lock is composed of two groups: one group is composed of two groups, the other group is composed of two groups. The IgE receptor α-lock system is composed of cells, cells, and antigen stimulation. The possibility of IgE reduction on the surface of cells is examined.