Sprouty2 による上皮間葉転換制御を介した扁平上皮癌転移抑制機構の解明

扁平上皮がんを制御する新たな治療薬として抗 PD-1 抗体（オプジーボ）があり、この PD-1 の細胞内シグナル伝達機構として免疫学的シナプスが形成されると、PD-1 と PD-L1 のライゲーションにより、PD-1 の ITSM 部位に SHP-2が動員され、PI3K、AKT、RASが脱リン酸化されて細胞内シグナルが減衰する。SPROUTY2 はSHP-2と同じく、RAS や PI3K を介した AKT 阻害因子として広く知られており、オプジーボの作用機序が SPROUTY2を介した細胞増殖シグナルの制御に応用できる。このことから、本年は、RAS-MAPK 経路および PI3K-AKT 経路における SPROUTY2 の作用を調べた。Western blot 解析の結果、線維芽細胞増殖因子 (bFGF) による刺激で活性化する ERK1/2 が SPROUTY2 の存在によりその活性化が抑制されており、また、AKT の活性化も SPROUTY2 が抑制していた。一方、同じ RTK シグナルを誘導する上皮増殖因子 (EGF）で刺激を行うと、SPROUTY2 の存在により ERK1/2 の活性化が増強するのに対し、AKT の活性化は SPROUTY2 の存在下では bFGF 刺激時と同様に抑制される結果となった。また、本実験では悪性腫瘍として骨肉腫の細胞株 SaOS-2 を使用していたことから、骨分化マーカーの誘導にSPROUTY2 がどのように作用しているかを Real-time PCR 法にて調べた。その結果、骨分化マーカーである RUNX2 と ALP の誘導が SPROUTY2 により誘導抑制をされていた。このことから、オプジーボ同様に SPROUTY2 が PI3K やRAS 経路を介する癌細胞の増殖抑制に関与することが示唆された。

扁平上皮がんを制御する新たな治療薬として抗 PD-1 抗体（オプジーボ）があり、この PD-1 の細胞内シグナル伝達機構として免疫学的シナプスが形成されると、PD-1 と PD-L1 のライゲーションにより、PD-1 の ITSM 部位に SHP-2が動員され、PI3K、AKT、RASが脱リン酸化されて細胞内シグナルが減衰する。SPROUTY2 はSHP-2と同じく、RAS や PI3K を介した AKT 阻害因子として広く知られており、オプジーボの作用機序が SPROUTY2を介した細胞増殖シグナルの制御に応用できる。このことから、本年は、RAS-MAPK 経路および PI3K-AKT 経路における SPROUTY2 の作用を調べた。Western blot 解析の結果、線維芽細胞増殖因子 (bFGF) による刺激で活性化する ERK1/2 が SPROUTY2 の存在によりその活性化が抑制されており、また、AKT の活性化も SPROUTY2 が抑制していた。一方、同じ RTK シグナルを誘導する上皮増殖因子 (EGF）で刺激を行うと、SPROUTY2 の存在により ERK1/2 の活性化が増強するのに対し、AKT の活性化は SPROUTY2 の存在下では bFGF 刺激時と同様に抑制される結果となった。また、本実験では悪性腫瘍として骨肉腫の細胞株 SaOS-2 を使用していたことから、骨分化マーカーの誘導にSPROUTY2 がどのように作用しているかを Real-time PCR 法にて調べた。その結果、骨分化マーカーである RUNX2 と ALP の誘導が SPROUTY2 により誘導抑制をされていた。このことから、オプジーボ同様に SPROUTY2 が PI3K やRAS 経路を介する癌細胞の増殖抑制に関与することが示唆された。