Elucidation of in vivo kinetics of leukemia cell differentiation and proliferation in blast crisis

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当研究は、急性転化後の白血病幹細胞および白血病細胞の全身レベルでの分化・動態・細胞周期情報を取得し、取得した情報をもとに細胞を分画し、分画間の分子発現情報比較から急性転化後の白血病幹細胞の性状を明らかにし、さらに新規の治療標的分子を見出すことを目的としている。令和3年度は、前年度に作製した急性転化後の白血病幹細胞および白血病細胞の全身レベルでの動態・細胞周期情報を取得できるBA/NH KikGRおよびBA/NH Fucci急性転化後白血病モデルマウス (ヒトCML原因遺伝子のBCR-ABL(BA)と急性骨髄性白血病への急性転化に関わるNUP98-HOXA9(NH)の両遺伝子を光変換蛍光タンパク質KikGRおよび細胞周期可視化タンパク質Fucci発現細胞に導入して作製)を用い、白血病細胞の分化依存的な全身細胞動態と細胞周期情報をフローサイトメトリーで取得し明らかにした。さらに細胞の動態情報を基に白血病幹細胞画分をソーティングする条件をBA/NH KikGR急性転化後白血病モデルで設定した。そしてソーティングした移動した細胞の幹細胞活性を半固形培地でのコロニーアッセイ、およびソーティングした細胞を移入マウスの白血病発症により確認した。白血病幹細胞の長期滞在ニッチの可視化検出に用いる分割GFPのGRAPHICシステムのアクセプターGFPマウスの個体取得を試みたが難航している。BA/NH KikGR急性転化後白血病モデルの骨髄細胞に、Akaluc-venusをレンチウイルスで導入し、白血病細胞のin vivo非侵襲検出の検討を開始した。