Molecular mechanism of epithelial sheet formation and its repair through the tight junction

上皮片层形成及其通过紧密连接修复的分子机制

• 批准号: 21H02684
• 负责人: 米村 重信
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02684/
• 关键词: 上皮シート; タイトジャンクション; 損傷修復; ミオシン; バリア機能; 張力; ZO-1

タイトジャンクション形成に関するシグナリングに関して、シグナル分子である三量体Gタンパクのαサブユニットに含まれる、G12alpha, G13alpha,がTJ形成に重要という報告が最近なされた。これまでG12alpha,, G13alpha,の活性化はその下流でミオシンを活性化させ、ストレスファイバー形成を促すと考えられてきた。これはミオシンの活性化がTJ形成に重要であることを示唆する。G12alpha,, G13alpha,の活性がTJ機能を阻害するという報告もあるので、状況は複雑だが、一方、DLD-1細胞ではカドヘリン接着を阻害してもさらにミオシン活性を阻害することでTJ形成が促進されるという結果を私たちは得ている。このあたりの矛盾を明らかにして、TJ形成におけるミオシンの役割を理解するため、G12alpha,, G13alpha,についてsiRNAによるノックダウンを試み、DLD-1細胞ではTJ形成が著しく阻害されることを確認した。市販のG12alpha,, G1alpha,抗体に関しては、細胞染色では核などへの非特異的反応が強いものの、TJ付近への集積も認められた。ミオシンによる張力と上皮シート修復との関係を明らかにするために、修復時に細胞表面蛋白質に対する抗体をコートした磁気ビーズを細胞表面に付着させ、その磁気ビーズをネオジム磁石で引っ張り、特定方向の力を与えるという実験を新たに行った。細胞には蛍光ミオシンを発現させており、修復時に形成されるアクトミオシンリングを追跡して修復の程度をモニターするというライブイメージングによって解析を行なった。傷害の穴が広がる方に力がかかった方が、修復のスピードが速いという興味深い結果が出ている。

This is the most important part of the report that contains the contents of G12alpha, G13alpha, TJ, and so on. G12 alphagraine, G13alpha, activating, indecent, activating, indecent, in The activation of TJ forms an important indicator of instigation. G12alpha, G13alpha, active TJ machine can block the performance of the report, copy the situation, one party, the DLD-1 cell, and then block the activity of the device to prevent the formation of the TJ to improve the performance of the report. The contradiction between the two is clear, and the TJ is used to understand the problem. G12alphathology, G13alpha, siRNA is used to prevent the loss of damage, and the DLD-1 cell is used to confirm the error. G12alpha, G1alpha, antibody antibody, cell staining, nuclear antibody, anti-specific antibody, TJ. In the process of repair, the cell surface protein, the antibody, the surface of the cell, the magnet, the force of the magnet, the force in the specific direction, the strength in the specific direction, the strength in the specific direction, the surface of the cell, the magnet, the magnet and the magnet. The computer system is used to determine the accuracy of the system, and to determine the accuracy of the repair process during repair. There is a deep taste in the acupoint, and the results show that there is a bad taste in the end.

项目成果

大腸上皮細胞のin vitro基底膜形成における近接線維芽細胞由来IV型コラーゲンの寄与

近端成纤维细胞衍生的 IV 型胶原对体外结肠上皮细胞基底膜形成的贡献

• 发表时间: 2022
• 作者: 栗栖 修作;天宅 あや;米村 重信
• 通讯作者: 米村 重信

アクチンフィラメントの流れと上皮細胞頂底極性形成との関係

肌动蛋白丝流与上皮细胞顶端极性形成的关系

• 发表时间: 2022
• 作者: 柴田 桂太朗;米村 重信
• 通讯作者: 米村 重信