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単一細胞殺傷法を用いた損傷修復並びに極性形成開始機構の研究

单细胞杀伤法研究损伤修复和极性启动机制

基本信息

批准号：
18657065
负责人：
米村重信
金额：
$ 2.18万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度確立したレーザー光による単一細胞殺傷法を使った実験系を用いて、本年度は細胞がどのようにして、損傷修復の特定の様式を選択するのか、またそれぞれの損傷修復の意義を探る実験を行った。損傷修復の様式には2種類あり、極性化した上皮細胞(細胞の周りを隙間なく接着構造が取り巻いている)の場合はアクトミオシンによるリングが傷口の周囲の細胞を貫くように形成され、その協調的な収縮によって傷口の修復と死細胞の排除が行なわれる。極性化の弱い上皮細胞や繊維芽細胞(細胞間の接着構造に大きな隙間が見られる)では、リングは形成されず、ラメリポディアの形成とそれにともなう個々の細胞の移動によって修復が行なわれる。このように細胞間の接着の様式により、修復の機構は異なるようである。それを確かめるため、細胞間の接着が阻害される、低カルシウムの培養条件下で損傷修復を行わせたところ、本来リングを作る、極性化した上皮細胞でもリングは形成されず、ラメリポディアによる修復が行われた。より特異的な実験として、細胞間接着に必須なαカテニン分子を発現しない細胞株とそれにαカテニンを導入して極性化した上皮になった細胞株とにおける損傷修復を比較した。この場合は培養液のカルシウムの有無にかかわらず、接着機能のない細胞にはリングは形成されず、ラメリポディアによって損傷修復が行われた。極性化した上皮細胞の特徴はバリア機能と呼ばれ、すなわちタイトジャンクションを持ち、上皮シートを介した物質の移動が制限されていることである。実際にタイトジャンクションを形成するタンパク質クローディンの挙動を観察すると、リングを使っての修復の場合はリングの修復とともにタイトジャンクションも速やかに延長してバリア機能の破綻を短時間にとどめていることがわかった。

This year, we have established a cell killing method to make the system work. This year, we will explore the significance of cell killing and damage repair. Damage repair involves two types of polarized epithelial cells (cell cycle, gap, and structure). In some cases, wound repair involves the formation, coordination, contraction, and elimination of dead cells. Polarized weak epithelial cells and vascular bud cells (intercellular bonding structure, large gaps, gaps, The cells are connected to each other, and the repair mechanism is different. In addition, under the culture conditions of low concentration, the damage repair of epithelial cells was carried out, and the original damage repair was carried out. The cell line must be transformed into a polarized cell line to repair damage. In this case, the culture medium has a variety of functions, such as cell formation, cell regeneration, and cell damage repair. The characteristics of polarized epithelial cells include: function, maintenance, and restriction of movement of epithelial substances. In the event of a crash, the crash will be detected and repaired in a short time.

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Specialized extraembryonic cells connect embryonic and extraembryonic epidermis in response to Dpp during dorsal closure in Drosophila.

果蝇背部闭合期间，专门的胚胎外细胞响应 Dpp 连接胚胎和胚胎外表皮。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Developmental Biology 301
影响因子：
0
作者：
Kaji;N.;et al.;T.Watanabe;Y.Miyake;A.Wada
通讯作者：
A.Wada

アクトミオシンリングの収縮による損傷修復の機構と意義

肌动球蛋白环收缩修复损伤的机制及意义

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Davoodi Vijeh Motlagh;N.;Seki;M.;Branzei;D.;Enomoto;T.;関政幸;関政幸/多田周右/榎本武美;T.Uesaka;E.Takaki;T.Watanabe;Y.Miyake;A.Wada;Y.Yamaguchi;米村重信
通讯作者：
米村重信

Regulation of myosin II dynamics by phosphorylation and dephosphorylation of its light chain in epithelial cells