权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Cellular mechanism of abdominal body wall closure

腹腔体壁闭合的细胞机制

基本信息

批准号：
19K07252
负责人：
川上潔
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K07252/
关键词：
一次腹壁細胞 Wnt2b タイムラプス蛍光色素腹壁形成 Six遺伝子細胞移動

项目摘要

本研究計画は腹壁形成に異常が生じるSix4/Six5 二重欠損マウスと野生型マウスを用いて、腹壁形成の細胞機序を明らかにすることを目的とする。本年度は下記の実験を行い、研究計画を終了した。1. 初期腹壁における体腔上皮細胞及び間葉細胞の標識とタイムラプス観察全胚培養マウスの体腔中に蛍光色素(CSFE)を注入し、体腔上皮細胞を標識した。培養1日後に標識した胚の初期腹壁の切片を作製し、蛍光顕微鏡観察したところ、標識された上皮細胞の一部が間葉に移動していた。体腔上皮細胞を標識する方法が確立できたので、今後、タイムラプス観察を行い、体腔上皮細胞の上皮間葉転換の様相、陥入した間葉細胞の移動速度や移動経路を、野生型とSix4/Six5 二重欠損マウス胚で比較解析する。2. 腹壁における細胞系譜の分子遺伝学的手法による追跡初期腹壁の体腔上皮細胞に早期から発現するWnt2b遺伝子下流にCreERT2遺伝子を発現するマウスを筑波大学と共同で構築した。本マウスをLacZ発現レポーターマウスと交配し、Tamoxifen投与2日後に胚のX-gal染色を行った。内在性のWnt2b遺伝子の発現部位にLacZの発現を認めた。これらのマウスとSix4/Six5 二重欠損マウスとを交配したうえ、腹壁細胞の細胞移動や形態を野生型マウス胚の細胞と比較観察中である。

This research project focuses on the abnormality of abdominal wall formation. Six4/Six5 The double damage to the wild-type maize is used, and the abdominal wall-forming cell machine sequence is the purpose of the maize. This year, I will write down the progress and completion of the research plan. 1. To identify coelomocyte epithelial cells and mesenchymal cells in the early stage of the abdominal wall, the whole embryo was cultured in the coelom and the coelomic epithelial cells were identified by injecting CSFE. After 1 day of culture, the sections of the early abdominal wall of the embryo were marked, the microscopic observation was carried out, and the epithelial cells were marked and the mesenchyme was moved. Body cavity epithelial cell labeling method is established, and the body cavity epithelial cell The phase of epithelial-mesenchymal transition, the movement speed and path of mesenchymal cells, wild-type Six4/Six5 Comparative analysis of the double loss of masu embryo. 2. The method of molecular genetics of abdominal wall cell lineage traces the early stage of abdominal wall coelom epithelial cells and their appearance.るWnt2b伝子箷にCreERT2伝子を発出开するマウスをTsukuba University and jointly built by した. The original LacZ test was carried out in the laboratory, and the embryos were stained with X-gal 2 days after the administration of Tamoxifen. Intrinsic nature of Wnt2b remains of the child's present part of LacZ.これらのマウスとSix4/Six5 Double defective マウスとをmating したうえ, abdominal wall cell のcell movement やmorphology をwild type マウスEmbryo のcell と comparison observation である.